Skip to content
MR1
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

Documents

MR1

Cell line · Product number 305000

MR1 is a hybridoma cell line derived from the fusion of spleen cells with NS-1 myeloma cells, following the immunization of animals with mouse T cells, pa...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

MR1 เป็นสายพันธุ์เซลล์ไฮบริโดมาที่ได้จากการรวมเซลล์ตับอ่อนกับเซลล์ไมอีโลมา NS-1 หลังจากการสร้างภูมิคุ้มกันในสัตว์ด้วยเซลล์ T ของหนู โดยเฉพาะอย่างยิ่งชนิดย่อย Th1 เซลล์เหล่านี้แสดงออกของอิมมูโนโกลบูลิน โดยเฉพาะแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอลที่มุ่งเป้าไปที่ลิแกนด์ CD40 ของหนู (CD154 หรือที่รู้จักในชื่อ gp39 หรือ CD40L)ไอโซไทป์ของแอนติบอดีโมโนโคลนอลที่ผลิตได้คือ IgG CD154 เป็นโมเลกุลสำคัญที่มีบทบาทในการปฏิสัมพันธ์ของเซลล์ T โดยเฉพาะในการกระตุ้นเซลล์ B เนื่องจากการจับกับ CD40 บนเซลล์ B มีความจำเป็นต่อการเพิ่มจำนวน การเปลี่ยนแปลงลักษณะ และการผลิตอิมมูโนโกลบูลินของเซลล์ B การจับกันนี้ยังส่งผลต่อการกระตุ้นร่วมของเซลล์ T และการผลิตไซโตไคน์ ทำให้ CD154 เป็นเป้าหมายสำคัญสำหรับการแทรกแซงทางบำบัดในการปรับสมดุลภูมิคุ้มกัน

แอนติบอดีที่ได้จาก MR1 มีเป้าหมายเฉพาะและยับยั้งการปฏิสัมพันธ์ระหว่าง CD154 และ CD40 ซึ่งมีความสำคัญทางการรักษาในกระบวนการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่าง ๆ ที่น่าสนใจคือ แอนติบอดีต่อต้าน CD154 ได้ถูกนำมาใช้เพื่อกระตุ้นให้เซลล์ T ไม่ตอบสนองต่ออวัยวะที่ปลูกถ่ายในกระบวนการปลูกถ่ายอวัยวะ โดยการยับยั้งการปฏิสัมพันธ์ระหว่าง CD154 และ CD40 แอนติบอดี MR1 จะยับยั้งการกระตุ้นของเซลล์ T และการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่เกี่ยวข้อง ส่งเสริมให้เกิดภาวะการทนต่อสิ่งแปลกปลอมกลยุทธ์นี้มีคุณค่าอย่างยิ่งในการป้องกันการปฏิเสธอวัยวะในผู้รับการปลูกถ่าย เนื่องจากช่วยให้การรอดชีวิตของอวัยวะปลูกถ่ายในระยะยาวได้โดยไม่ต้องใช้ยากดภูมิคุ้มกันทั่วร่างกาย ซึ่งอาจมีผลข้างเคียงที่รุนแรงได้ ในแบบจำลองการทดลอง แอนติบอดี MR1 ได้แสดงให้เห็นถึงความสามารถในการยืดอายุการรอดชีวิตของเกาะเล็ก ๆ ในตับอ่อน ซึ่งมีความสำคัญในการรักษาโรคเบาหวานผ่านการปลูกถ่ายเกาะเล็ก ๆ

แอนติบอดี MR1 ยังถูกนำมาใช้ในการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับโรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง ซึ่งการกระตุ้นเซลล์ T และเซลล์ B อย่างไม่เหมาะสมผ่านปฏิสัมพันธ์ระหว่าง CD40-CD154 มีบทบาทสำคัญ โดยการทำงานยับยั้งปฏิสัมพันธ์เหล่านี้ แอนติบอดี MR1 สามารถช่วยปรับการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน ทำให้เป็นทางเลือกที่มีศักยภาพสำหรับการประยุกต์ใช้ในทางการรักษาที่นอกเหนือจากการปลูกถ่ายอวัยวะ รวมถึงในภาวะภูมิคุ้มกันทำลายตนเองและโรคความผิดปกติของเซลล์เม็ดเลือดขาวบางชนิดงานวิจัยและเอกสารสิทธิบัตรได้สำรวจการใช้ MR1 ในหลากหลายการประยุกต์ใช้ ซึ่งเน้นย้ำถึงความสำคัญในด้านการควบคุมภูมิคุ้มกันและการพัฒนาแอนติบอดีเพื่อการรักษา

02Classification

Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลิมโฟบลาสต์

04Identifiers

Citation
MR1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305000)
NCBI TaxID
10090/10032
Cellosaurus
CVCL_8964

05Expression and susceptibility

Protein expression
อิมมูโนโกลบูลิน, โมโนโคลนอลแอนติบอดี, ต่อต้านเมาส์ CD40 ลิแกนด์ (CD154, CD40L, gp39)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, 2-mercaptoethanol 0.05 mM
Subculturing
ค่อยๆ ปรับให้เซลล์ในขวดมีความสม่ำเสมอโดยการดูดและปล่อยขึ้นลง จากนั้นนำตัวอย่างที่เป็นตัวแทนมาเพื่อกำหนดความหนาแน่นของเซลล์ต่อมิลลิลิตร เจือจางสารแขวนลอยให้ได้ความเข้มข้นของเซลล์ 1 x 105 เซลล์/มิลลิลิตร ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ และแบ่งสารแขวนลอยที่ปรับแล้วใส่ขวดใหม่สำหรับการเพาะเลี้ยงต่อไป
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า