Ga naar de inhoud
MR1
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

Documenten

MR1

Cell line · Productnummer 305000

MR1 is een hybridomacellijn die is ontstaan uit de fusie van miltcellen met NS-1-myeloomcellen, na immunisatie van dieren met muizen-T-cellen, pa...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Weinig op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

MR1 is een hybrideoomcellijn die is afgeleid van de fusie van miltcellen met NS-1 myeloomcellen, na immunisatie van dieren met muizen T-cellen, met name van het subtype Th1. Deze cellen brengen immunoglobuline tot expressie, specifiek monoklonale antilichamen gericht tegen het muis-CD40-ligand (CD154, ook bekend als gp39 of CD40L). Het isotype van het geproduceerde monoklonale antilichaam is IgG. CD154 is een cruciale molecule die betrokken is bij T-celinteracties, met name bij de activering van B-cellen, aangezien de binding aan CD40 op B-cellen essentieel is voor de proliferatie, differentiatie en productie van immunoglobulinen van B-cellen. Deze binding beïnvloedt ook de kostenimulatie en cytokineproductie van T-cellen, waardoor CD154 een belangrijk doelwit wordt voor therapeutische interventie in immuunmodulatie.

Van MR1 afgeleide antilichamen richten zich specifiek op de interactie tussen CD154 en CD40 en blokkeren deze, wat therapeutische implicaties heeft in verschillende immuunreacties. Antilichamen tegen CD154 zijn met name gebruikt om T-celongevoeligheid voor transplantatieorganen te induceren. Door de CD154-CD40 interactie te blokkeren, remmen MR1 antilichamen T-celactivatie en de bijbehorende immuunrespons, waardoor een tolerantietoestand wordt bevorderd. Deze strategie is vooral waardevol bij het voorkomen van orgaanafstoting bij ontvangers van transplantaten, omdat het langdurige overleving van het transplantaat mogelijk maakt zonder de noodzaak van systemische immunosuppressiva, die veel bijwerkingen kunnen hebben. In experimentele modellen hebben MR1 antilichamen het vermogen aangetoond om de overleving van transplantaten van alvleesklierisocyten te verlengen, wat belangrijk is bij de behandeling van diabetes door middel van eilandjestransplantatie.

MR1-antilichamen worden ook gebruikt in onderzoek naar auto-immuunziekten, waarbij ongepaste activering van T-cellen en B-cellen via CD40-CD154-interacties een cruciale rol speelt. Door deze interacties te remmen, kunnen MR1-antilichamen immuunreacties helpen moduleren, waardoor ze potentiële kandidaten zijn voor therapeutische toepassingen buiten de transplantatie, waaronder auto-immuunziekten en bepaalde lymfoproliferatieve aandoeningen. Onderzoek en octrooiliteratuur hebben het gebruik van MR1 in verschillende toepassingen onderzocht, wat de relevantie ervan onderstreept op het gebied van immuunregulatie en de ontwikkeling van therapeutische antilichamen.

02Classificatie

Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Lymfoblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MR1 (Cytion catalogusnummer 305000)
NCBI-belastingnummer
10090/10032
Cellosaurus
CVCL_8964

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Immunoglobuline, monoklonaal antilichaam, tegen muis CD40 ligand (CD154, CD40L, gp39)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 0,05 mM 2-mercaptoethanol
Heruitplanten
Homogeniseer de celsuspensie in de kolf voorzichtig door op en neer te pipetteren en neem vervolgens een representatief monster om de celdichtheid per ml te bepalen. Verdun de suspensie tot een celconcentratie van 1 x 105 cellen/ml met vers kweekmedium en verdeel de aangepaste suspensie in nieuwe kolven voor verdere kweek.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.