Pereiti prie turinio
MR1
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

Dokumentai

MR1

Cell line · Prekės numeris 305000

MR1 – tai hibridomų ląstelių linija, gauta sujungus blužnies ląsteles su NS-1 mielomos ląstelėmis po gyvūnų imunizacijos pelių T ląstelėmis, pa...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Mažos atsargos
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MR1 - tai hibridominių ląstelių linija, gauta sujungus blužnies ląsteles su NS-1 mielominėmis ląstelėmis, imunizavus gyvūnus pelių T ląstelėmis, ypač Th1 potipio ląstelėmis. Šios ląstelės ekspresuoja imunoglobuliną, ypač monokloninius antikūnus, nukreiptus į pelės CD40 ligandą (CD154, dar vadinamą gp39 arba CD40L). Gaminamų monokloninių antikūnų izotipas yra IgG. CD154 yra labai svarbi molekulė, dalyvaujanti T ląstelių sąveikoje, ypač aktyvuojant B ląsteles, nes jos prisijungimas prie B ląstelių CD40 yra būtinas B ląstelių proliferacijai, diferenciacijai ir imunoglobulinų gamybai. Šis prisijungimas taip pat turi įtakos T ląstelių kostimuliacijai ir citokinų gamybai, todėl CD154 yra svarbus taikinys, į kurį galima nukreipti terapinę intervenciją imuninės moduliacijos srityje.

MR1 išvesti antikūnai specifiškai veikia ir blokuoja CD154 ir CD40 sąveiką, o tai turi terapinės reikšmės įvairioms imuninėms reakcijoms. Visų pirma, antikūnai prieš CD154 buvo naudojami siekiant sukelti T ląstelių nereagavimą į organų transplantatus. Blokuodami CD154-CD40 sąveiką, MR1 antikūnai slopina T ląstelių aktyvaciją ir su ja susijusį imuninį atsaką, skatindami tolerancijos būseną. Ši strategija ypač vertinga siekiant išvengti organų atmetimo transplantuotų recipientų organizme, nes leidžia ilgai išgyventi transplantantams, nenaudojant sisteminių imunosupresantų, kurie gali turėti didelį šalutinį poveikį. Eksperimentiniuose modeliuose MR1 antikūnai įrodė, kad jie gali prailginti kasos salelių transplantato išgyvenamumą, o tai yra svarbu gydant diabetą salelių transplantacijos būdu.

MR1 antikūnai taip pat naudojami atliekant tyrimus, susijusius su autoimuninėmis ligomis, kuriose svarbų vaidmenį vaidina netinkamas T ir B ląstelių aktyvavimas per CD40-CD154 sąveiką. Slopindami šias sąveikas, MR1 antikūnai gali padėti moduliuoti imunines reakcijas, todėl juos galima taikyti ne tik transplantacijai, bet ir autoimuninėms ligoms bei tam tikriems limfoproliferaciniams sutrikimams gydyti. Moksliniuose tyrimuose ir patentinėje literatūroje nagrinėjamas MR1 panaudojimas įvairiose srityse, pabrėžiant jo svarbą imuninio reguliavimo ir terapinių antikūnų kūrimo srityje.

02Klasifikacija

Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Limfoblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
MR1 (Cytion katalogo numeris 305000)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090/10032
Cellosaurus
CVCL_8964

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Imunoglobulinas, monokloninis antikūnas prieš pelės CD40 ligandą (CD154, CD40L, gp39)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, 0,05 mM 2-merkaptoetanolio
Subkultūrinis auginimas
Švelniai homogenizuokite kolboje esantį ląstelių suspensiją, pipetuodami aukštyn ir žemyn, tada paimkite reprezentatyvią mėginį, kad nustatytumėte ląstelių tankį ml. Praskieskite suspensiją, kad pasiektumėte 1 x 105 ląstelių/ml koncentraciją šviežia kultūrinė terpė, ir padalinkite pakoreguotą suspensiją į naujas kolbas tolesniam auginimui.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.