Przejdź do treści
MR1
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

Dokumenty

MR1

Cell line · Numer produktu 305000

MR1 to linia komórkowa hybrydomowa powstała w wyniku fuzji komórek śledziony z komórkami szpiczaka NS-1, po immunizacji zwierząt mysimi komórkami T, pa...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
Niski stan magazynowy
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

MR1 to linia komórek hybrydoma pochodząca z fuzji komórek śledziony z komórkami szpiczaka NS-1 po immunizacji zwierząt mysimi limfocytami T, szczególnie podtypu Th1. Komórki te wykazują ekspresję immunoglobulin, w szczególności przeciwciał monoklonalnych ukierunkowanych na mysi ligand CD40 (CD154, znany również jako gp39 lub CD40L). Izotyp wytwarzanego przeciwciała monoklonalnego to IgG. CD154 jest kluczową cząsteczką zaangażowaną w interakcje komórek T, szczególnie w aktywację komórek B, ponieważ jego wiązanie z CD40 na komórkach B jest niezbędne do proliferacji, różnicowania i produkcji immunoglobulin. Wiązanie to wpływa również na kostymulację komórek T i produkcję cytokin, czyniąc CD154 ważnym celem interwencji terapeutycznej w modulacji immunologicznej.

Przeciwciała pochodzące z MR1 specyficznie celują i blokują interakcję między CD154 i CD40, co ma implikacje terapeutyczne w różnych odpowiedziach immunologicznych. W szczególności, przeciwciała anty-CD154 zostały wykorzystane do wywołania braku odpowiedzi komórek T na przeszczepy narządów. Blokując interakcję CD154-CD40, przeciwciała MR1 hamują aktywację komórek T i związaną z nią odpowiedź immunologiczną, promując stan tolerancji. Strategia ta jest szczególnie cenna w zapobieganiu odrzucaniu narządów u biorców przeszczepów, ponieważ umożliwia długotrwałe przeżycie przeszczepu bez konieczności stosowania ogólnoustrojowych leków immunosupresyjnych, które mogą mieć rozległe skutki uboczne. W modelach eksperymentalnych przeciwciała MR1 wykazały zdolność do przedłużania przeżycia przeszczepu wysepek trzustkowych, co jest istotne w leczeniu cukrzycy poprzez przeszczep wysepek.

Przeciwciała MR1 są również wykorzystywane w badaniach związanych z chorobami autoimmunologicznymi, w których kluczową rolę odgrywa niewłaściwa aktywacja limfocytów T i limfocytów B poprzez interakcje CD40-CD154. Hamując te interakcje, przeciwciała MR1 mogą pomóc w modulowaniu odpowiedzi immunologicznej, co czyni je potencjalnymi kandydatami do zastosowań terapeutycznych poza przeszczepami, w tym w chorobach autoimmunologicznych i niektórych zaburzeniach limfoproliferacyjnych. W literaturze badawczej i patentowej badano wykorzystanie MR1 w różnych zastosowaniach, podkreślając jego znaczenie w dziedzinie regulacji immunologicznej i rozwoju przeciwciał terapeutycznych.

02Klasyfikacja

Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Limfoblast

04Identyfikatory

Źródło
MR1 (numer katalogowy Cytion 305000)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090/10032
Cellosaurus
CVCL_8964

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Immunoglobulina, przeciwciało monoklonalne przeciwko mysiemu ligandowi CD40 (CD154, CD40L, gp39)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 0,05 mM 2-merkaptoetanolu
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie homogenizować zawiesinę komórek w kolbie, pipetując w górę i w dół, a następnie pobrać reprezentatywną próbkę w celu określenia gęstości komórek na ml. Rozcieńczyć zawiesinę świeżym podłożem hodowlanym, aby uzyskać stężenie komórek wynoszące 1 x 105 komórek/ml, a następnie podzielić dostosowaną zawiesinę na porcje w nowych kolbach w celu dalszej hodowli.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.