Μετάβαση στο περιεχόμενο
MR1
Ιδιότητες ανάπτυξης
Αναστολή
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

Έγγραφα

MR1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305000

Η MR1 είναι μια κυτταρική σειρά υβριδωμάτων που προέρχεται από τη σύντηξη κυττάρων σπλήνας με κύτταρα μυελώματος NS-1, μετά την ανοσοποίηση ζώων με Τ-κύτταρα ποντικού, πα...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Χαμηλά αποθέματα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Το MR1 είναι μια σειρά κυττάρων υβριδώματος που προέρχεται από τη σύντηξη κυττάρων σπληνός με κύτταρα μυελώματος NS-1, μετά από ανοσοποίηση ζώων με Τ-κύτταρα ποντικού, ιδίως του υποτύπου Th1. Τα κύτταρα αυτά εκφράζουν ανοσοσφαιρίνη, και συγκεκριμένα μονοκλωνικά αντισώματα που στοχεύουν τον ligand CD40 ποντικού (CD154, επίσης γνωστό ως gp39 ή CD40L). Ο ισότυπος του παραγόμενου μονοκλωνικού αντισώματος είναι IgG. Το CD154 είναι ένα κρίσιμο μόριο που εμπλέκεται στις αλληλεπιδράσεις των Τ κυττάρων, ιδίως στην ενεργοποίηση των Β κυττάρων, καθώς η σύνδεσή του με το CD40 στα Β κύτταρα είναι απαραίτητη για τον πολλαπλασιασμό, τη διαφοροποίηση και την παραγωγή ανοσοσφαιρίνης των Β κυττάρων. Η σύνδεση αυτή επηρεάζει επίσης την κοστοδιέγερση των Τ κυττάρων και την παραγωγή κυτταροκινών, καθιστώντας το CD154 σημαντικό στόχο για θεραπευτική παρέμβαση στη διαμόρφωση του ανοσοποιητικού συστήματος.

Τα αντισώματα που προέρχονται από το MR1 στοχεύουν ειδικά και εμποδίζουν την αλληλεπίδραση μεταξύ CD154 και CD40, γεγονός που έχει θεραπευτικές επιπτώσεις σε διάφορες ανοσολογικές αποκρίσεις. Ειδικότερα, αντισώματα κατά του CD154 έχουν χρησιμοποιηθεί για την πρόκληση μη ανταπόκρισης των Τ-κυττάρων σε μοσχεύματα οργάνων κατά τη μεταμόσχευση. Αποκλείοντας την αλληλεπίδραση CD154-CD40, τα αντισώματα MR1 αναστέλλουν την ενεργοποίηση των Τ-κυττάρων και τη σχετική ανοσολογική απόκριση, προωθώντας μια κατάσταση ανοχής. Αυτή η στρατηγική είναι ιδιαίτερα πολύτιμη για την πρόληψη της απόρριψης οργάνων σε λήπτες μοσχευμάτων, καθώς επιτρέπει τη μακροχρόνια επιβίωση του μοσχεύματος χωρίς την ανάγκη συστηματικών ανοσοκατασταλτικών, τα οποία μπορεί να έχουν εκτεταμένες παρενέργειες. Σε πειραματικά μοντέλα, τα αντισώματα MR1 έχουν επιδείξει την ικανότητα να παρατείνουν την επιβίωση του μοσχεύματος παγκρεατικών νησιδίων, γεγονός σημαντικό για τη θεραπεία του διαβήτη μέσω μεταμόσχευσης νησιδίων.

Τα αντισώματα MR1 χρησιμοποιούνται επίσης στην έρευνα που σχετίζεται με αυτοάνοσα νοσήματα, όπου η ακατάλληλη ενεργοποίηση των Τ κυττάρων και των Β κυττάρων μέσω των αλληλεπιδράσεων CD40-CD154 διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο. Αναστέλλοντας αυτές τις αλληλεπιδράσεις, τα αντισώματα MR1 μπορούν να συμβάλουν στη διαμόρφωση των ανοσολογικών αποκρίσεων, καθιστώντας τα δυνητικά υποψήφια για θεραπευτικές εφαρμογές πέραν της μεταμόσχευσης, συμπεριλαμβανομένων των αυτοάνοσων παθήσεων και ορισμένων λεμφοϋπερπλαστικών διαταραχών. Η ερευνητική βιβλιογραφία και η βιβλιογραφία διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας έχουν διερευνήσει τη χρήση του MR1 σε διάφορες εφαρμογές, υπογραμμίζοντας τη σημασία του στον τομέα της ρύθμισης του ανοσοποιητικού συστήματος και της ανάπτυξης θεραπευτικών αντισωμάτων.

02Ταξινόμηση

Ιδιότητες ανάπτυξης
Αναστολή
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Λεμφοβλάστες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
MR1 (αριθμός καταλόγου Cytion 305000)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090/10032
Κελλοσαύρος
CVCL_8964

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
Ανοσοσφαιρίνη, μονοκλωνικό αντίσωμα, έναντι του συνδέτη CD40 ποντικού (CD154, CD40L, gp39)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 0,05 mM 2-μερκαπτοαιθανόλη
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Ομογενοποιήστε απαλά το κυτταρικό εναιώρημα στη φιάλη με πιπέτωση προς τα πάνω και προς τα κάτω και, στη συνέχεια, λάβετε ένα αντιπροσωπευτικό δείγμα για να προσδιορίσετε την κυτταρική πυκνότητα ανά ml. Αραιώστε το εναιώρημα για να επιτύχετε συγκέντρωση κυττάρων 1 x 105 κύτταρα/ml με φρέσκο μέσο καλλιέργειας και μεταφέρετε το ρυθμισμένο εναιώρημα σε νέες φιάλες για περαιτέρω καλλιέργεια.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.