Prejsť na obsah
MR1
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

Dokumenty

MR1

Cell line · Číslo výrobku 305000

MR1 je hybridómová bunková línia, ktorá vznikla fúziou buniek sleziny s myelómovými bunkami NS-1 po imunizácii zvierat myšími T-bunkami, pa...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Nízke zásoby
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

MR1 je hybridómová bunková línia odvodená z fúzie buniek sleziny s myelómovými bunkami NS-1 po imunizácii zvierat myšími T-bunkami, najmä podtypu Th1. Tieto bunky exprimujú imunoglobulín, konkrétne monoklonálne protilátky zamerané na myší ligand CD40 (CD154, známy aj ako gp39 alebo CD40L). Izotyp produkovanej monoklonálnej protilátky je IgG. CD154 je kľúčová molekula, ktorá sa podieľa na interakciách T buniek, najmä na aktivácii B buniek, keďže jej väzba na CD40 na B bunkách je nevyhnutná pre proliferáciu, diferenciáciu a produkciu imunoglobulínov B buniek. Táto väzba ovplyvňuje aj kostimuláciu T buniek a produkciu cytokínov, čím sa CD154 stáva dôležitým cieľom terapeutických zásahov pri imunitnej modulácii.

Protilátky odvodené od MR1 sa špecificky zameriavajú na interakciu medzi CD154 a CD40 a blokujú ju, čo má terapeutický význam pri rôznych imunitných reakciách. Protilátky proti CD154 sa použili najmä na vyvolanie nereaktivity T-buniek na transplantované orgány. Blokovaním interakcie CD154-CD40 protilátky MR1 inhibujú aktiváciu T-buniek a s tým spojenú imunitnú odpoveď, čím podporujú stav tolerancie. Táto stratégia je obzvlášť cenná pri prevencii rejekcie orgánov u príjemcov transplantátov, pretože umožňuje dlhodobé prežívanie štepu bez potreby systémových imunosupresív, ktoré môžu mať rozsiahle vedľajšie účinky. V experimentálnych modeloch protilátky MR1 preukázali schopnosť predĺžiť prežívanie štepu pankreatických ostrovčekov, čo je významné pri liečbe cukrovky prostredníctvom transplantácie ostrovčekov.

Protilátky MR1 sa využívajú aj vo výskume súvisiacom s autoimunitnými ochoreniami, pri ktorých hrá rozhodujúcu úlohu nevhodná aktivácia T-buniek a B-buniek prostredníctvom interakcií CD40-CD154. Inhibíciou týchto interakcií môžu protilátky MR1 pomôcť modulovať imunitné reakcie, čo z nich robí potenciálnych kandidátov na terapeutické aplikácie mimo transplantácie, vrátane autoimunitných stavov a určitých lymfoproliferatívnych porúch. Vo výskumnej a patentovej literatúre sa skúma využitie MR1 v rôznych aplikáciách, čo zdôrazňuje jej význam v oblasti regulácie imunity a vývoja terapeutických protilátok.

02Klasifikácia

Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblast

04Identifikátory

Citácia
MR1 (katalógové číslo Cytion 305000)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090/10032
Cellosaurus
CVCL_8964

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Imunoglobulín, monoklonálna protilátka proti myšiemu ligandu CD40 (CD154, CD40L, gp39)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 0,05 mM 2-merkaptoetanolu
Rozmnožovanie kultúr
Jemne homogenizujte bunkovú suspenziu v banke pipetovaním hore a dole, potom odoberte reprezentatívnu vzorku na stanovenie hustoty buniek na ml. Suspenziu zrieďte čerstvým kultivačným médiom, aby ste dosiahli koncentráciu buniek 1 x 105 buniek/ml, a upravenú suspenziu rozdeľte do nových baniek na ďalšie kultivovanie.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.