Skip to content
MR1
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

Documents

MR1

Cell line · Product number 305000

MR1 is a hybridoma cell line derived from the fusion of spleen cells with NS-1 myeloma cells, following the immunization of animals with mouse T cells, pa...

US$395.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

MR1 הוא קו תאים היברידומטיים שמקורו במיזוג תאי טחול עם תאי מיאלומה NS-1, לאחר חיסון בעלי חיים בתאי T של עכברים, במיוחד מתת-סוג Th1. תאים אלה מבטאים אימונוגלובולינים, ובפרט נוגדנים מונוקלונליים המכוונים נגד הליגנד CD40 של עכברים (CD154, הידוע גם כ-gp39 או CD40L). האיזוטופ של הנוגדן המונוקלונלי המיוצר הוא IgG. CD154 הוא מולקולה חיונית המעורבת באינטראקציות של תאי T, במיוחד בהפעלת תאי B, שכן קישורו ל-CD40 בתאי B חיוני להתרבות תאי B, להתמיינותם ולייצור אימונוגלובולינים. קישור זה משפיע גם על קוסטמולציה של תאי T וייצור ציטוקינים, מה שהופך את CD154 ליעד חשוב להתערבות טיפולית במודולציה חיסונית.

נוגדנים שמקורם ב-MR1 מכוונים באופן ספציפי וחוסמים את האינטראקציה בין CD154 ל-CD40, דבר שיש לו השלכות טיפוליות בתגובות חיסוניות שונות. ראוי לציין כי נוגדנים נגד CD154 שימשו כדי לגרום לתאי T לא להגיב להשתלות איברים. על ידי חסימת האינטראקציה בין CD154 ל-CD40, נוגדני MR1 מעכבים את הפעלת תאי T ואת התגובה החיסונית הנלווית, ומקדמים מצב של סובלנות. אסטרטגיה זו חשובה במיוחד במניעת דחיית איברים בקרב מושתלי איברים, שכן היא מאפשרת הישרדות ארוכת טווח של השתל ללא צורך בתרופות מדכאות חיסון מערכתיות, העלולות לגרום לתופעות לוואי נרחבות. במודלים ניסויים, נוגדנים מסוג MR1 הוכיחו את יכולתם להאריך את הישרדות השתל של איי הלבלב, דבר משמעותי בטיפול בסוכרת באמצעות השתלת איי לבלב.

נוגדני MR1 משמשים גם במחקר הקשור למחלות אוטואימוניות, שבהן הפעלה לא תקינה של תאי T ותאי B באמצעות אינטראקציות CD40-CD154 ממלאת תפקיד קריטי. על ידי עיכוב אינטראקציות אלה, נוגדני MR1 יכולים לסייע בוויסות התגובות החיסוניות, מה שהופך אותם למועמדים פוטנציאליים ליישומים טיפוליים מעבר להשתלות, כולל במצבים אוטואימוניים ובהפרעות לימפופרוליפרטיביות מסוימות. מחקרים וספרות פטנטים בחנו את השימוש ב-MR1 ביישומים שונים, והדגישו את הרלוונטיות שלו בתחום ויסות המערכת החיסונית ופיתוח נוגדנים טיפוליים.

02Classification

Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
לימפוציט

04Identifiers

Citation
MR1 (מספר קטלוגי Cytion 305000)
NCBI TaxID
10090/10032
Cellosaurus
CVCL_8964

05Expression and susceptibility

Protein expression
אימונוגלובולין, נוגדן מונוקלונלי, נגד ליגנד CD40 של עכבר (CD154, CD40L, gp39)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, 0.05 mM 2-mercaptoethanol
Subculturing
הומוגניזציה עדינה של תמיסת התאים בבקבוק באמצעות פיפטה למעלה ולמטה, ולאחר מכן לקיחת דגימה מייצגת כדי לקבוע את צפיפות התאים למ"ל. דילול התמיסה כדי להשיג ריכוז תאים של 1 x 105 תאים/מ"ל עם מצע תרבית טרי, וחלוקת התמיסה המותאמת לבקבוקים חדשים להמשך התרבית.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.