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Cellules FO-1 (MEL-CLS-1)
Tissue
Peau
Disease
Mélanome amélanotique
Metastatic site
Ganglion lymphatique iliaque
Synonyms
FO-1, FO #1, FO 1, MEL-CLS-1

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Cellules FO-1 (MEL-CLS-1)

Cell line · Product number 300175

The FO-1 cell line, also known as MEL-CLS-1, is a human amelanotic melanoma line derived from a metastatic site, specifically the iliac lymph node of a Ca...

US$800.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

La lignée cellulaire FO-1, également connue sous le nom de MEL-CLS-1, est une lignée de mélanome amélanotique humain dérivée d’un site métastatique, plus précisément du ganglion lymphatique iliaque d’un patient de type caucasien. Cette lignée cellulaire a été établie à partir d’une xénogreffe, ce qui renforce encore son utilité dans la recherche axée sur le mélanome métastatique. Le mélanome amélanotique, dont est issue la lignée FO-1, se caractérise par l’absence de pigment mélanique, ce qui la rend particulièrement précieuse pour l’étude des sous-types de mélanome dépourvus de la pigmentation typique associée à ces tumeurs.

La lignée cellulaire FO-1 présente un temps de doublement d’environ 38 heures, particulièrement observable au 49e passage. Ce taux de croissance relativement rapide la rend appropriée pour les expériences nécessitant une prolifération cellulaire rapide. Les cellules FO-1 sont connues pour leur sensibilité différentielle à divers traitements, notamment leur réactivité aux effets différenciateurs et antiprolifératifs de l’interféron bêta (IFN-β) et du 12-O-tétradécanoyl-phorbol-13-acétate (TPA), ce qui en fait un modèle essentiel pour l’étude de la modulation des antigènes associés au mélanome et de l’expression des antigènes HLA dans diverses conditions expérimentales.

Tissue
Peau
Disease
Mélanome amélanotique
Metastatic site
Ganglion lymphatique iliaque
Synonyms
  • FO-1
  • FO #1
  • FO 1
  • MEL-CLS-1

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
Oui, chez les souris nues
Karyotype
Numéro modal 51, gamme 38-56

04Identifiers

Citation
FO-1 (MEL-CLS-1) (numéro de catalogue Cytion 300175)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_5619

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53(+)
Mutational profile
Mutation BRAF V600E
Viruses
Résultats négatifs pour : Sendai, Ectromelia, Polyoma, virus K, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M. pulmonis, MVM, GD VII de Theiler, H-1 de Toolan, MHV, LDV, RCV/SDA, adénovirus M, B. piliformis.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
1 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
Tous les trois jours
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
54 ans
Ethnicity
caucasien