Pāriet uz saturu
FO-1 (MEL-CLS-1) šūnas
Audums
Āda
Slimība
Amelanotiskā melanoma
Metastāžu vieta
Iliaka limfmezgls
Sinonīmi
FO-1, FO #1, FO 1, MEL-CLS-1

Dokumenti

FO-1 (MEL-CLS-1) šūnas

Cell line · Preces numurs 300175

FO-1 šūnu līnija, kas pazīstama arī kā MEL-CLS-1, ir cilvēka amelanotiskās melanomas šūnu līnija, kas iegūta no metastāzes vietas, konkrēti, no kāda pacienta iegurņa limfmezgla...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

FO-1 šūnu līnija, zināma arī kā MEL-CLS-1, ir cilvēka amelanotiskās melanomas līnija, kas iegūta no metastāzes vietas, konkrēti, kaukāziešu pacienta gūžas limfmezgla. Šī šūnu līnija tika izveidota no ksenogrāfta, tādējādi nodrošinot tās lietderību pētījumos, kas vērsti uz metastātisku melanomu. Amelanotiskajai melanomai, no kuras radusies FO-1, ir raksturīgs melanīna pigmenta trūkums, tāpēc tā ir īpaši vērtīga melanomas apakštipu izpētei, kuriem trūkst šiem audzējiem raksturīgās pigmentācijas.

FO-1 šūnu līnijai ir aptuveni 38 stundu dubultošanās laiks, kas īpaši novērojams 49. pasāžas laikā. Šis relatīvi ātrais augšanas ātrums padara to piemērotu eksperimentiem, kuros nepieciešama strauja šūnu proliferācija. FO-1 šūnas ir pazīstamas ar to atšķirīgo jutību pret dažādiem ārstēšanas līdzekļiem, tostarp ar to reakciju uz interferona beta (IFN-β) un 12-O-tetradekanoil-forbol-13-acetāta (TPA) diferencējošo un antiproliferatīvo iedarbību, padarot tās par ļoti svarīgu modeli ar melanomu saistīto antigēnu un HLA antigēnu ekspresijas modulācijas pētījumiem dažādos eksperimentālos apstākļos.

Audums
Āda
Slimība
Amelanotiskā melanoma
Metastāžu vieta
Iliaka limfmezgls
Sinonīmi
  • FO-1
  • FO #1
  • FO 1
  • MEL-CLS-1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Kariotips
Modālais numurs 51, diapazons 38-56

04Identifikatori

Atsauce
FO-1 (MEL-CLS-1) (Cytion kataloga numurs 300175)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_5619

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
P53(+)
Mutāciju profils
BRAF V600Emut
Vīrusi
Negatīvs par: Sendai, Ectromelia, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
54 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis