Přejít na obsah
Buňky FO-1 (MEL-CLS-1)
Tkáň
Kůže
Nemoc
Amelanotický melanom
Místo metastázy
Ilická lymfatická uzlina
Synonyma
FO-1, FO #1, FO 1, MEL-CLS-1

Dokumenty

Buňky FO-1 (MEL-CLS-1)

Cell line · Číslo výrobku 300175

Buněčná linie FO-1, známá také jako MEL-CLS-1, je lidská linie amelanotického melanomu odvozená z místa metastázy, konkrétně z kyčelní lymfatické uzliny pacienta s Ca...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie FO-1, známá také jako MEL-CLS-1, je linie lidského amelanotického melanomu odvozená z metastatického ložiska, konkrétně z ilické lymfatické uzliny kavkazského pacienta. Tato buněčná linie byla vytvořena z xenotransplantátu, což dále zajišťuje její užitečnost ve výzkumu zaměřeném na metastatický melanom. Amelanotický melanom, z něhož FO-1 pochází, je charakterizován absencí melaninového pigmentu, což z něj činí zvláště cenný materiál pro studium podtypů melanomu, které postrádají typickou pigmentaci spojenou s těmito nádory.

Buněčná linie FO-1 vykazuje dobu zdvojení přibližně 38 hodin, což se projevuje zejména při 49. pasáži. Díky této relativně rychlé rychlosti růstu je vhodná pro experimenty vyžadující rychlou buněčnou proliferaci. Buňky FO-1 jsou známé svou diferencovanou citlivostí na různé léčebné postupy, včetně citlivosti na diferenciační a antiproliferační účinky interferonu beta (IFN-β) a 12-O-tetradekanoyl-forbol-13-acetátu (TPA), což z nich činí kritický model pro studium modulace antigenů spojených s melanomem a exprese HLA antigenů za různých experimentálních podmínek.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Amelanotický melanom
Místo metastázy
Ilická lymfatická uzlina
Synonyma
  • FO-1
  • FO #1
  • FO 1
  • MEL-CLS-1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Tumorogenní
Ano, u nahých myší
Karyotyp
Modální číslo 51, rozsah 38-56

04Identifikátory

Citace
FO-1 (MEL-CLS-1) (katalogové číslo Cytion 300175)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5619

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53(+)
Mutační profil
BRAF V600Emut
Viry
Negativní pro: M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
Každé 3 dny
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
54 let
Etnická příslušnost
Kavkazský