Gå til innholdet
FO-1 (MEL-CLS-1)-celler
Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Iliac lymfeknute
Synonymer
FO-1, FO #1, FO 1, MEL-CLS-1

Dokumenter

FO-1 (MEL-CLS-1)-celler

Cell line · Produktnummer 300175

FO-1-cellelinjen, også kjent som MEL-CLS-1, er en human amelanotisk melanomcellelinje som stammer fra et metastatisk sted, nærmere bestemt en iliakalymfeknute hos en Ca...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

FO-1-cellelinjen, også kjent som MEL-CLS-1, er en human amelanotisk melanomlinje som stammer fra et metastatisk område, nærmere bestemt den iliacale lymfeknuten til en kaukasisk pasient. Denne cellelinjen ble etablert fra et xenotransplantat, noe som ytterligere sikrer at den kan brukes i forskning på metastatisk melanom. Amelanotisk melanom, som FO-1 stammer fra, kjennetegnes av fravær av melaninpigment, noe som gjør den spesielt verdifull for studier av melanomsubtyper som mangler den typiske pigmenteringen som er forbundet med disse svulstene.

FO-1-cellelinjen har en fordoblingstid på ca. 38 timer, noe som er spesielt tydelig ved 49. passasje. Denne relativt raske veksthastigheten gjør den egnet for eksperimenter som krever rask celleproliferasjon. FO-1-celler er kjent for sin differensierte følsomhet for ulike behandlinger, blant annet for den differensierende og antiproliferative effekten av interferon-beta (IFN-β) og 12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetat (TPA), noe som gjør dem til en viktig modell for å studere moduleringen av melanomassosierte antigener og HLA-antigenuttrykk under ulike eksperimentelle forhold.

Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Iliac lymfeknute
Synonymer
  • FO-1
  • FO #1
  • FO 1
  • MEL-CLS-1

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Tumorinduserende
Ja, i nakne mus
Karyotype
Modalnummer 51, område 38-56

04Identifikatorer

Kildehenvisning
FO-1 (MEL-CLS-1) (Cytion-katalognummer 300175)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_5619

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
P53(+)
Mutasjonsprofil
BRAF V600Emut
Virus
Negativ for: Sendai, ektromeli, polyom, K-virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M. pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B. piliformis.

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
Hver tredje dag
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
54 år
Etnisitet
Kaukasisk