Przejdź do treści
Komórki FO-1 (MEL-CLS-1)
Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak amelanotyczny
Miejsce przerzutów
Węzeł chłonny biodrowy
Synonimy
FO-1, FO #1, FO 1, MEL-CLS-1

Dokumenty

Komórki FO-1 (MEL-CLS-1)

Cell line · Numer produktu 300175

Linia komórkowa FO-1, znana również jako MEL-CLS-1, to ludzka linia komórkowa czerniaka bezbarwnikowego pochodząca z ogniska przerzutowego, a konkretnie z węzła chłonnego biodrowego pacjenta z...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa FO-1, znana również jako MEL-CLS-1, to ludzka linia czerniaka amelanotycznego pochodząca z miejsca przerzutu, w szczególności z biodrowego węzła chłonnego pacjenta rasy kaukaskiej. Ta linia komórkowa została utworzona z ksenoprzeszczepu, co dodatkowo zapewnia jej użyteczność w badaniach nad czerniakiem z przerzutami. Czerniak amelanotyczny, z którego pochodzi FO-1, charakteryzuje się brakiem pigmentu melaniny, co czyni go szczególnie cennym do badania podtypów czerniaka, które nie mają typowej pigmentacji związanej z tymi nowotworami.

Linia komórkowa FO-1 wykazuje czas podwojenia wynoszący około 38 godzin, szczególnie zauważalny przy 49. pasażowaniu. To stosunkowo szybkie tempo wzrostu sprawia, że nadaje się ona do eksperymentów wymagających szybkiej proliferacji komórek. Komórki FO-1 są znane ze swojej zróżnicowanej wrażliwości na różne terapie, w tym na różnicujące i antyproliferacyjne działanie interferonu-beta (IFN-β) i 12-O-tetradekanoilo-forbol-13-octanu (TPA), co czyni je krytycznym modelem do badania modulacji antygenów związanych z czerniakiem i ekspresji antygenów HLA w różnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak amelanotyczny
Miejsce przerzutów
Węzeł chłonny biodrowy
Synonimy
  • FO-1
  • FO #1
  • FO 1
  • MEL-CLS-1

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy
Karyotyp
Numer modalny 51, zakres 38-56

04Identyfikatory

Źródło
FO-1 (MEL-CLS-1) (numer katalogowy Cytion 300175)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5619

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
P53(+)
Profil mutacji
BRAF V600Emut
Wirusy
Negatywne dla: Sendai, Ectromelia, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
54 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski