Skip to content
תאים FO-1 (MEL-CLS-1)
Tissue
עור
Disease
מלנומה ללא מלנוציטים
Metastatic site
בלוטת לימפה איליאקית
Synonyms
FO-1, FO #1, FO 1, MEL-CLS-1

Documents

תאים FO-1 (MEL-CLS-1)

Cell line · Product number 300175

The FO-1 cell line, also known as MEL-CLS-1, is a human amelanotic melanoma line derived from a metastatic site, specifically the iliac lymph node of a Ca...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

קו התאים FO-1, הידוע גם בשם MEL-CLS-1, הוא קו של מלנומה אנושית ללא מלנין שמקורו באתר גרורתי, ובאופן ספציפי בבלוטת הלימפה האיליאקית של חולה ממוצא קווקזי. קו תאים זה הוקם מתרופה זרה, מה שמבטיח עוד יותר את שימושיותו במחקר המתמקד במלנומה גרורתית. מלנומה ללא מלנין, שממנה מקורו של FO-1, מאופיינת בהיעדר פיגמנט מלנין, מה שהופך אותה ליקרת ערך במיוחד לחקר תת-סוגים של מלנומה שחסרים את הפיגמנטציה האופיינית לגידולים אלה.

קו התאים FO-1 מציג זמן הכפלה של כ-38 שעות, הבולט במיוחד במעבר ה-49. קצב גדילה מהיר יחסית זה הופך אותו למתאים לניסויים הדורשים התרבות תאים מהירה. תאי FO-1 ידועים ברגישותם הדיפרנציאלית לטיפולים שונים, כולל תגובתם להשפעות ההבחנה והאנטי-פרוליפרטיביות של אינטרפרון-בטא (IFN-β) ו-12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate (TPA), מה שהופך אותם למודל קריטי לחקר המודולציה של אנטיגנים הקשורים למלנומה וביטוי אנטיגן HLA בתנאים ניסויים שונים.

Tissue
עור
Disease
מלנומה ללא מלנוציטים
Metastatic site
בלוטת לימפה איליאקית
Synonyms
  • FO-1
  • FO #1
  • FO 1
  • MEL-CLS-1

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים
Karyotype
מספר מודאלי 51, טווח 38-56

04Identifiers

Citation
FO-1 (MEL-CLS-1) (מספר קטלוגי Cytion 300175)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_5619

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53(+)
Mutational profile
BRAF V600Emut
Viruses
שלילי ל: סנדאי, אקטרומליה, פוליומה, נגיף K, קילהם, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 3 ימים
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
54 שנים
Ethnicity
קווקזי