Siirry sisältöön
FO-1 (MEL-CLS-1) solut
Kudos
Iho
Sairaus
Amelanoottinen melanooma
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
FO-1, FO #1, FO 1, MEL-CLS-1

Asiakirjat

FO-1 (MEL-CLS-1) solut

Cell line · Tuotenumero 300175

FO-1-solulinja, joka tunnetaan myös nimellä MEL-CLS-1, on ihmisen amelanotinen melanoomisolulinja, joka on peräisin etäpesäkkeestä, tarkemmin sanottuna Ca:n suoliluun imusolmukkeesta...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

FO-1-solulinja, joka tunnetaan myös nimellä MEL-CLS-1, on ihmisen amelanoottinen melanoomalinja, joka on peräisin metastaattisesta paikasta, erityisesti kaukasialaisen potilaan suoliluun imusolmukkeesta. Tämä solulinja muodostettiin ksenograftista, mikä varmistaa sen hyödyllisyyden metastaattiseen melanoomaan keskittyvässä tutkimuksessa. Amelanoottiselle melanoomalle, josta FO-1 on peräisin, on ominaista melaniinipigmentin puuttuminen, mikä tekee siitä erityisen arvokkaan tutkittaessa melanooman alatyyppejä, joista puuttuu näille kasvaimille tyypillinen pigmentti.

FO-1-solulinjan kaksinkertaistumisaika on noin 38 tuntia, ja se on havaittavissa erityisesti 49. läpikäynnissä. Tämän suhteellisen nopean kasvunopeuden ansiosta se soveltuu kokeisiin, joissa tarvitaan solujen nopeaa lisääntymistä. FO-1-solut tunnetaan erilaisesta herkkyydestään erilaisille hoidoille, mukaan lukien niiden herkkyys interferoni-beetan (IFN-β) ja 12-O-tetradekanyyli-forboli-13-asetaatin (TPA) erilaistaville ja lisääntymistä estäville vaikutuksille, mikä tekee niistä kriittisen mallin melanoomaan liittyvien antigeenien ja HLA-antigeenien ilmentymisen modulaation tutkimiseen erilaisissa koeolosuhteissa.

Kudos
Iho
Sairaus
Amelanoottinen melanooma
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
  • FO-1
  • FO #1
  • FO 1
  • MEL-CLS-1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä
Karyotyyppi
Modaalinumero 51, vaihteluväli 38-56

04Tunnisteet

Lähdeviite
FO-1 (MEL-CLS-1) (Cytionin luettelonumero 300175)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_5619

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
P53(+)
Mutaatioprofiili
BRAF V600Emut
Virukset
Negatiivinen: MVM, Theilerin GD VII, Toolanin H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
3 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
54 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen