Mine otse sisu juurde
FO-1 (MEL-CLS-1) rakud
Kude
Nahk
Haigus
Amelanootiline melanoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlmede lümfisõlmede
Sünonüümid
FO-1, FO #1, FO 1, MEL-CLS-1

Dokumendid

FO-1 (MEL-CLS-1) rakud

Cell line · Toote number 300175

FO-1 rakuliin, mida tuntakse ka nimetusega MEL-CLS-1, on inimese amelanootilise melanoomi rakuliin, mis on saadud metastaasikohast, täpsemalt Ca... niude lümfisõlmest...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

FO-1 rakuliin, tuntud ka kui MEL-CLS-1, on inimese amelanootilise melanoomi liin, mis on saadud metastaatilisest asukohast, täpsemalt kaukaasia patsiendi lümfisõlmest. See rakuliin on loodud ksenotransplantaadist, mis tagab selle kasulikkuse metastaatilise melanoomi uurimisel. Amelanootilist melanoomi, millest FO-1 pärineb, iseloomustab melaniinipigmendi puudumine, mis muudab selle eriti väärtuslikuks selliste melanoomi alatüüpide uurimiseks, millel puudub nende kasvajatega seotud tüüpiline pigmentatsioon.

FO-1 rakuliinil on kahekordistumisaeg ligikaudu 38 tundi, mis on eriti märgatav 49. läbimisel. See suhteliselt kiire kasvukiirus muudab selle sobivaks katsete jaoks, mis nõuavad rakkude kiiret paljunemist. FO-1 rakud on tuntud oma erineva tundlikkuse poolest erinevate ravimeetodite suhtes, sealhulgas nende tundlikkus interferoon-beta (IFN-β) ja 12-O-tetradekanoüül-phorbol-13-atsetaadi (TPA) diferentseeriva ja antiproliferatiivse toime suhtes, mis teeb neist kriitilise mudeli melanoomiga seotud antigeenide ja HLA antigeenide ekspressiooni muutmise uurimiseks erinevates katsetingimustes.

Kude
Nahk
Haigus
Amelanootiline melanoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlmede lümfisõlmede
Sünonüümid
  • FO-1
  • FO #1
  • FO 1
  • MEL-CLS-1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Karyotüüp
Modaalne number 51, vahemik 38-56

04Tunnused

Viide
FO-1 (MEL-CLS-1) (Cytioni katalooginumber 300175)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_5619

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53(+)
Mutatsiooniprofiil
BRAF V600Emut
Viirused
Negatiivne: M.pulmonis, MVM, Theileri GD VII, Toolani H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenoviirus, B.piliformis.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
54 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia