
- Tissue
- Utérin
- Disease
- Tumeur mésodermique mixte, compatible avec un léiomyosarcome (grade III)
- Synonyms
- SK UT 1, SKUT-1, SKUT1, Skut1
Documents
01General information
- Description
La lignée cellulaire SK-UT-1 est dérivée d’un léiomyosarcome utérin humain (ULMS), une forme de cancer très agressive prenant naissance dans le muscle lisse de l’utérus. Cette lignée cellulaire constitue un modèle clé pour l’étude de la tumorigenèse, des métastases et de la résistance aux médicaments dans le cadre de l’ULMS. Les cellules SK-UT-1 présentent les caractéristiques des sarcomes, notamment une prolifération rapide, une faible différenciation et une résistance aux traitements conventionnels. Elles sont notamment utilisées pour étudier les cellules souches cancéreuses (CSC), qui jouent un rôle important dans la récidive du cancer et la résistance à la chimiothérapie. Des recherches ont permis d’identifier une sous-population de CSC CD133+ au sein des cellules SK-UT-1, qui présentent une capacité accrue d’auto-renouvellement, de formation de colonies et de résistance à l’apoptose.
Les études menées sur les cellules SK-UT-1 se sont concentrées sur la caractérisation des CSC CD133+, révélant leur capacité à former des sphères tumorales, une caractéristique indicative d’un comportement de type cellules souches. Cette sous-population présente un potentiel tumorigène accru in vivo, où même un petit nombre de cellules (10⁴) suffit à déclencher la formation d’une tumeur dans des modèles de xénogreffes. Les cellules CD133+ font preuve d’une résistance aux agents chimiothérapeutiques tels que la doxorubicine, ce qui confirme davantage leur rôle dans la résistance au traitement. De plus, des niveaux élevés de marqueurs associés aux CSC, notamment CD44, ALDH1 et BMI1, ont été observés dans les cellules CD133+ par rapport à leurs homologues CD133−, ce qui confirme leur rôle de cellules souches cancéreuses.
Les cellules SK-UT-1 sont devenues un outil essentiel pour comprendre la progression du SMUL et pour élaborer des stratégies thérapeutiques potentielles. Cibler la population de cellules de type souche cancéreuse CD133+ au sein de ces tumeurs pourrait constituer une approche prometteuse pour améliorer les résultats chez les patients atteints de SMUL en s’attaquant aux causes profondes des métastases et de la chimiorésistance.
- Tissue
- Utérin
- Disease
- Tumeur mésodermique mixte, compatible avec un léiomyosarcome (grade III)
- Synonyms
- SK UT 1
- SKUT-1
- SKUT1
- Skut1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Tumourigenic
- Oui, chez les souris nues. Il provoque un sarcome à cellules fusiformes.
- Karyotype
- (P8) de l'hypodiploïdie à l'hyperdiploïdie. Produit de fréquence phénotypique : 0,0590
04Identifiers
- Citation
- SK-UT-1 (numéro de catalogue Cytion 300455)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0533
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B.
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Seeding density
- 1 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 75 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes