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SK-UT-1
Tessuto
Uterino
Malattia
Tumore mesodermico misto, coerente con leiomiosarcoma (grado III)
Sinonimi
SK UT 1, SKUT-1, SKUT1, Skut1

Documenti

SK-UT-1

Cell line · Codice prodotto 300455

The SK-UT-1 cell line is derived from human uterine leiomyosarcoma (ULMS), a highly aggressive form of cancer originating in the smooth muscle of the uter...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare SK-UT-1 deriva dal leiomiosarcoma uterino umano (ULMS), una forma di cancro altamente aggressiva che ha origine nella muscolatura liscia dell'utero. Questa linea cellulare è un modello chiave per lo studio della tumorigenesi, delle metastasi e della resistenza ai farmaci nell'ULMS. Le cellule SK-UT-1 presentano caratteristiche tipiche dei sarcomi, tra cui rapida proliferazione, scarsa differenziazione e resistenza alle terapie convenzionali. In particolare, sono utilizzate per studiare le cellule staminali tumorali (CSC), che svolgono un ruolo significativo nella recidiva del cancro e nella resistenza alla chemioterapia. La ricerca ha identificato una sottopopolazione di CSC CD133+ all'interno delle cellule SK-UT-1, che dimostrano un maggiore auto-rinnovamento, formazione di colonie e resistenza all'apoptosi.

Gli studi che utilizzano SK-UT-1 si sono concentrati sulla caratterizzazione delle CSC CD133+, rivelando la loro capacità di formare tumorsfere, una caratteristica indicativa di un comportamento simile a quello delle cellule staminali. Questa sottopopolazione mostra un aumento del potenziale tumorigenico in vivo, dove anche un numero ridotto di cellule (104) è sufficiente per avviare la formazione di tumori in modelli di xenotrapianto. Le cellule CD133+ mostrano resistenza agli agenti chemioterapici come la doxorubicina, il che conferma ulteriormente il loro ruolo nella resistenza alla terapia. Inoltre, nelle cellule CD133+ sono stati riscontrati livelli elevati di marcatori correlati alle CSC, tra cui CD44, ALDH1 e BMI1, rispetto alle loro controparti CD133−, confermando il loro ruolo di cellule staminali tumorali.

Le cellule SK-UT-1 sono diventate uno strumento fondamentale per comprendere la progressione dell'ULMS e sviluppare potenziali strategie terapeutiche. Il targeting della popolazione di cellule staminali tumorali CD133+ all'interno di questi tumori può offrire un approccio promettente per migliorare i risultati nei pazienti con ULMS, affrontando le cause alla radice delle metastasi e della chemioresistenza.

Tessuto
Uterino
Malattia
Tumore mesodermico misto, coerente con leiomiosarcoma (grado III)
Sinonimi
  • SK UT 1
  • SKUT-1
  • SKUT1
  • Skut1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi. Forma un sarcoma a cellule fusate
Cariotipo
(P8) da ipodiploide a iperdiploide. Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0590

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SK-UT-1 (numero di catalogo Cytion 300455)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0533

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B.

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
2 volte a settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
75 anni
Etnia
Caucasico