ACT-1

A linhagem celular ACT-1 tem origem em uma cepa do fungo mucilaginoso Dictyostelium discoideum, que serve como um valioso modelo para o estudo da dinâmica da actina e da motilidade celular. No Dictyostelium, a actina desempenha um papel fundamental na organização do citoesqueleto, particularmente no processo de quimiotaxia e na agregação celular em condições de privação de nutrientes. A linhagem celular ACT-1 tem sido essencial para a análise das interações de anticorpos monoclonais com a actina, especialmente na identificação de regiões específicas de ligação nos monômeros de actina e na avaliação das respostas estruturais e funcionais da actina a diversas interações moleculares. Estudos utilizando a ACT-1 contribuíram significativamente para a compreensão de como as regiões amino-terminais da actina interagem com anticorpos e influenciam a polimerização da actina, destacando regiões cruciais para as transições de monômero para filamento e para a estabilização.

Em particular, a ACT-1 tem sido utilizada para examinar anticorpos monoclonais capazes de impedir a polimerização da actina por meio da ligação seletiva às formas monoméricas da actina. Essa ligação inibe a formação de filamentos ao estabilizar a actina em seu estado monomérico, o que reduz o comprimento e a viscosidade dos filamentos quando introduzida em filamentos de actina já existentes. Esses efeitos são úteis para o estudo de proteínas reguladoras da actina e de seus mecanismos nos processos celulares. Dada sua especificidade, a linhagem ACT-1 é fundamental tanto para ensaios bioquímicos quanto para estudos de imunofluorescência, que utilizam anticorpos monoclonais anti-actina para mapear domínios estruturais da actina e avaliar os papéis reguladores das proteínas de ligação à actina na arquitetura celular.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.