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ACT-1
Tissue
Hybridome
Synonyms
Act I, ACT 1, ACT I

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ACT-1

Cell line · Product number 305461

The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...

US$540.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire ACT-1 provient d’une souche du champignon visqueux Dictyostelium discoideum, qui constitue un modèle précieux pour l’étude de la dynamique de l’actine et de la motilité cellulaire. Chez Dictyostelium, l’actine joue un rôle central dans l’organisation du cytosquelette, en particulier dans les processus de chimiotaxie et d’agrégation cellulaire en cas de privation de nutriments. La lignée cellulaire ACT-1 s’est avérée essentielle pour analyser les interactions des anticorps monoclonaux avec l’actine, notamment pour distinguer les régions de liaison spécifiques sur les monomères d’actine et pour évaluer les réponses structurelles et fonctionnelles de l’actine à diverses interactions moléculaires. Les études menées à l’aide d’ACT-1 ont grandement contribué à la compréhension de la manière dont les régions amino-terminales de l’actine interagissent avec les anticorps et influencent la polymérisation de l’actine, mettant en évidence les régions cruciales pour la transition des monomères en filaments et leur stabilisation.

En particulier, la lignée ACT-1 a été utilisée pour étudier des anticorps monoclonaux capables d’empêcher la polymérisation de l’actine en se liant de manière sélective aux formes monomères de l’actine. Cette liaison inhibe la formation de filaments en stabilisant l’actine à l’état monomère, ce qui réduit la longueur et la viscosité des filaments lorsqu’elle est introduite dans des filaments d’actine existants. Ces effets sont utiles pour étudier les protéines régulatrices de l’actine et leurs mécanismes dans les processus cellulaires. Compte tenu de sa spécificité, la lignée ACT-1 est essentielle tant pour les essais biochimiques que pour les études d’immunofluorescence, qui utilisent des anticorps monoclonaux anti-actine pour cartographier les domaines structurels de l’actine et évaluer les rôles régulateurs des protéines se liant à l’actine dans l’architecture cellulaire.

Tissue
Hybridome
Synonyms
  • Act I
  • ACT 1
  • ACT I

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type lymphoblaste
Cell type
Les cellules de la rate ont été fusionnées avec des cellules de myélome NS-1

04Identifiers

Citation
ACT-1 (numéro de catalogue Cytion 305461)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4499

05Expression and susceptibility

Protein expression
Immunoglobuline monoclonale (IgG1) dirigée contre les actines de Dictyostelium discoideum

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,1 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Recueillez les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et lavez délicatement les cellules adhérentes avec du PBS sans calcium ni magnésium (utilisez 3 à 5 ml pour les flacons T25 et 5 à 10 ml pour les flacons T75). Appliquez de l’Accutase (1 à 2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à bien recouvrir toute la couche cellulaire. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l’incubation, combinez la suspension et les cellules adhérentes, puis centrifugez le tout. Après la centrifugation, remettez soigneusement le culot cellulaire en suspension et transférez la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.