ACT-1
Cell line · Product number 305461
The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire ACT-1 provient d’une souche du champignon visqueux Dictyostelium discoideum, qui constitue un modèle précieux pour l’étude de la dynamique de l’actine et de la motilité cellulaire. Chez Dictyostelium, l’actine joue un rôle central dans l’organisation du cytosquelette, en particulier dans les processus de chimiotaxie et d’agrégation cellulaire en cas de privation de nutriments. La lignée cellulaire ACT-1 s’est avérée essentielle pour analyser les interactions des anticorps monoclonaux avec l’actine, notamment pour distinguer les régions de liaison spécifiques sur les monomères d’actine et pour évaluer les réponses structurelles et fonctionnelles de l’actine à diverses interactions moléculaires. Les études menées à l’aide d’ACT-1 ont grandement contribué à la compréhension de la manière dont les régions amino-terminales de l’actine interagissent avec les anticorps et influencent la polymérisation de l’actine, mettant en évidence les régions cruciales pour la transition des monomères en filaments et leur stabilisation.
En particulier, la lignée ACT-1 a été utilisée pour étudier des anticorps monoclonaux capables d’empêcher la polymérisation de l’actine en se liant de manière sélective aux formes monomères de l’actine. Cette liaison inhibe la formation de filaments en stabilisant l’actine à l’état monomère, ce qui réduit la longueur et la viscosité des filaments lorsqu’elle est introduite dans des filaments d’actine existants. Ces effets sont utiles pour étudier les protéines régulatrices de l’actine et leurs mécanismes dans les processus cellulaires. Compte tenu de sa spécificité, la lignée ACT-1 est essentielle tant pour les essais biochimiques que pour les études d’immunofluorescence, qui utilisent des anticorps monoclonaux anti-actine pour cartographier les domaines structurels de l’actine et évaluer les rôles régulateurs des protéines se liant à l’actine dans l’architecture cellulaire.
- Tissue
- Hybridome
- Synonyms
- Act I
- ACT 1
- ACT I
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type lymphoblaste
- Cell type
- Les cellules de la rate ont été fusionnées avec des cellules de myélome NS-1
04Identifiers
- Citation
- ACT-1 (numéro de catalogue Cytion 305461)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4499
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Immunoglobuline monoclonale (IgG1) dirigée contre les actines de Dictyostelium discoideum
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,1 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Recueillez les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et lavez délicatement les cellules adhérentes avec du PBS sans calcium ni magnésium (utilisez 3 à 5 ml pour les flacons T25 et 5 à 10 ml pour les flacons T75). Appliquez de l’Accutase (1 à 2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à bien recouvrir toute la couche cellulaire. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l’incubation, combinez la suspension et les cellules adhérentes, puis centrifugez le tout. Après la centrifugation, remettez soigneusement le culot cellulaire en suspension et transférez la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
