Skip to content
ACT-1
Tissue
Hybridoma
Synonyms
Act I, ACT 1, ACT I

Documents

ACT-1

Cell line · Product number 305461

The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào ACT-1 có nguồn gốc từ một chủng nấm nhầy Dictyostelium discoideum, vốn là một mô hình quý giá để nghiên cứu động học của actin và khả năng vận động của tế bào. Trong Dictyostelium, actin đóng vai trò then chốt trong việc tổ chức bộ khung tế bào, đặc biệt là trong quá trình hóa hướng động và sự kết tụ tế bào khi thiếu hụt chất dinh dưỡng. Dòng tế bào ACT-1 đã đóng vai trò thiết yếu trong việc phân tích tương tác giữa kháng thể đơn dòng với actin, đặc biệt là trong việc xác định các vùng liên kết cụ thể trên các monome actin và đánh giá các phản ứng cấu trúc và chức năng của actin đối với các tương tác phân tử khác nhau. Các nghiên cứu sử dụng ACT-1 đã đóng góp đáng kể vào việc hiểu rõ cách các vùng đầu N-terminal của actin tương tác với kháng thể và ảnh hưởng đến quá trình polymer hóa actin, đồng thời làm nổi bật các vùng quan trọng cho quá trình chuyển đổi từ monome sang sợi và quá trình ổn định.

Đặc biệt, ACT-1 đã được sử dụng để nghiên cứu các kháng thể đơn dòng có khả năng ức chế quá trình polymer hóa actin bằng cách gắn kết chọn lọc với các dạng monome của actin. Sự gắn kết này ức chế quá trình hình thành sợi bằng cách ổn định actin ở trạng thái monome, từ đó làm giảm chiều dài sợi và độ nhớt khi được đưa vào các sợi actin hiện có. Những tác động này rất hữu ích cho việc nghiên cứu các protein điều hòa actin và cơ chế hoạt động của chúng trong các quá trình tế bào. Nhờ tính đặc hiệu của mình, dòng ACT-1 đóng vai trò quan trọng trong cả các thử nghiệm sinh hóa và nghiên cứu miễn dịch huỳnh quang, vốn sử dụng các kháng thể đơn dòng chống actin để xác định các miền cấu trúc của actin và đánh giá vai trò điều hòa của các protein liên kết với actin trong kiến trúc tế bào.

Tissue
Hybridoma
Synonyms
  • Act I
  • ACT 1
  • ACT I

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào lymphoblast-like
Cell type
Các tế bào lách đã được hợp nhất với các tế bào u tủy NS-1

04Identifiers

Citation
ACT-1 (Mã sản phẩm Cytion 305461)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4499

05Expression and susceptibility

Protein expression
Kháng thể đơn dòng (IgG1) chống lại các protein actin của Dictyostelium discoideum

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,1 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Thu thập các tế bào treo lơ lửng vào ống 15 ml và nhẹ nhàng rửa các tế bào bám dính bằng PBS không chứa canxi và magiê (sử dụng 3-5 ml cho bình T25 và 5-10 ml cho bình T75). Áp dụng Accutase (1-2 ml cho bình T25, 2,5 ml cho bình T75) đảm bảo phủ đều lớp tế bào. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. Sau khi ủ, trộn và ly tâm cả tế bào treo lơ lửng và tế bào bám dính. Sau khi ly tâm, nhẹ nhàng hòa tan lại khối tế bào và chuyển hỗn hợp tế bào vào bình mới chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.