Přejít na obsah
ACT-1
Tkáň
Hybridoma
Synonyma
Act I, ACT 1, ACT I

Dokumenty

ACT-1

Cell line · Číslo výrobku 305461

The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie ACT-1 pochází z kmene slizovky Dictyostelium discoideum, která slouží jako cenný model pro studium dynamiky aktinu a buněčné motility. U Dictyostelium hraje aktin klíčovou roli v organizaci cytoskeletu, zejména v procesu chemotaxe a buněčné agregace při nedostatku živin. Buněčná linie ACT-1 je nepostradatelná pro analýzu interakcí monoklonálních protilátek s aktinem, zejména při rozlišování specifických vazebných oblastí na monomerech aktinu a při hodnocení strukturálních a funkčních reakcí aktinu na různé molekulární interakce. Studie využívající ACT-1 významně přispěly k pochopení toho, jak aminoterminální oblasti aktinu interagují s protilátkami a ovlivňují polymeraci aktinu, přičemž zdůraznily oblasti klíčové pro přechod z monomerů na filamenty a jejich stabilizaci.

Linie ACT-1 byla zejména použita ke zkoumání monoklonálních protilátek, které mohou zabránit polymeraci aktinu tím, že se selektivně vážou na monomerní formy aktinu. Tato vazba inhibuje tvorbu filamentů tím, že stabilizuje aktin v jeho monomerním stavu, což při zavedení do stávajících aktinových filamentů snižuje délku filamentů a viskozitu. Tyto účinky jsou užitečné pro studium proteinů regulujících aktin a jejich mechanismů v buněčných procesech. Vzhledem ke své specificitě je řada ACT-1 nepostradatelná jak pro biochemické testy, tak pro imunofluorescenční studie, které využívají monoklonální protilátky proti aktinu k mapování strukturálních domén aktinu a k posouzení regulačních rolí proteinů vázajících se na aktin v buněčné architektuře.

Tkáň
Hybridoma
Synonyma
  • Act I
  • ACT 1
  • ACT I

02Klasifikace

Organismus
Myš
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblastům podobné
Typ buňky
Buňky sleziny byly fúzovány s myelomovými buňkami NS-1

04Identifikátory

Citace
ACT-1 (katalogové číslo Cytion 305461)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4499

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Monoklonální imunoglobulin (IgG1) namířený proti aktinům Dictyostelium discoideum

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.