Gå direkte til indholdet
ACT-1
Væv
Hybridom
Synonymer
Act I, ACT 1, ACT I

Dokumenter

ACT-1

Cell line · Varenummer 305461

The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

ACT-1-cellelinjen stammer fra en stamme af slimskimmelen Dictyostelium discoideum, som fungerer som en værdifuld model til undersøgelse af aktindynamik og cellulær bevægelighed. I Dictyostelium spiller aktin en central rolle i organiseringen af cytoskelettet, især i forbindelse med kemotaksi og cellulær aggregering under næringsmangel. ACT-1-cellelinjen har været afgørende for analysen af monoklonale antistoffers interaktioner med aktin, især med hensyn til at skelne mellem specifikke bindingsregioner på aktinmonomerer og vurdere aktins strukturelle og funktionelle reaktioner på forskellige molekylære interaktioner. Undersøgelser med ACT-1 har bidraget væsentligt til forståelsen af, hvordan aktins aminoterminale regioner interagerer med antistoffer og påvirker aktinpolymerisationen, hvilket fremhæver regioner, der er afgørende for overgangen fra monomer til filament og stabilisering.

ACT-1 er især blevet anvendt til at undersøge monoklonale antistoffer, der kan forhindre aktinpolymerisation ved selektivt at binde sig til monomere former af aktin. Denne binding hæmmer filamentdannelsen ved at stabilisere aktin i dets monomere tilstand, hvilket reducerer filamentlængden og viskositeten, når det tilføres eksisterende aktinfilamenter. Disse effekter er nyttige til at studere aktinregulerende proteiner og deres mekanismer i cellulære processer. I betragtning af dens specificitet er ACT-1-linjen afgørende for både biokemiske analyser og immunfluorescensundersøgelser, som anvender monoklonale anti-aktin-antistoffer til at kortlægge strukturelle aktindomæner og vurdere aktinbindende proteiners regulerende roller i den cellulære arkitektur.

Væv
Hybridom
Synonymer
  • Act I
  • ACT 1
  • ACT I

02Klassificering

Organisme
Mus
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast-lignende
Celletype
Miltceller blev fusioneret med NS-1-myelomceller

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ACT-1 (Cytion-katalognummer 305461)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4499

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Monoklonalt immunoglobulin (IgG1) mod aktiner fra Dictyostelium discoideum

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,1 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Saml de suspenderede celler i et 15 ml rør, og vask forsigtigt de klæbende celler med PBS uden calcium og magnesium (brug 3-5 ml til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml til T25-kolber, 2,5 ml til T75-kolber) for at sikre fuld dækning af cellelaget. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 10 minutter. Efter inkubationen kombineres og centrifugeres både suspensionen og de vedhæftede celler. Efter centrifugering resuspenderes cellepelleten forsigtigt, og cellesuspensionen overføres til nye kolber, der indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.