ACT-1
Cell line · Numer produktu 305461
The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...
Dostosowanie / Zalecenia
- ACT-1Cell line€550.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa ACT-1 pochodzi ze szczepu śluzowca Dictyostelium discoideum, który stanowi cenny model do badania dynamiki aktyny i ruchliwości komórkowej. W Dictyostelium aktyna odgrywa kluczową rolę w organizacji cytoszkieletu, szczególnie w procesie chemotaksji i agregacji komórek w warunkach niedoboru składników odżywczych. Linia komórkowa ACT-1 okazała się niezbędna do analizy interakcji przeciwciał monoklonalnych z aktyną, zwłaszcza w rozróżnianiu specyficznych regionów wiązania na monomerach aktyny oraz w ocenie strukturalnych i funkcjonalnych reakcji aktyny na różne interakcje molekularne. Badania z wykorzystaniem linii ACT-1 w znacznym stopniu przyczyniły się do zrozumienia, w jaki sposób regiony amino-końcowe aktyny oddziałują z przeciwciałami i wpływają na polimeryzację aktyny, wskazując regiony kluczowe dla przejścia z postaci monomerowej do włóknistej oraz dla stabilizacji włókien.
W szczególności linia ACT-1 została wykorzystana do badania przeciwciał monoklonalnych, które mogą zapobiegać polimeryzacji aktyny poprzez selektywne wiązanie się z jej formami monomerycznymi. Wiązanie to hamuje tworzenie włókien poprzez stabilizację aktyny w stanie monomerycznym, co zmniejsza długość włókien i lepkość po wprowadzeniu do istniejących włókien aktynowych. Efekty te są przydatne w badaniu białek regulujących aktynę oraz ich mechanizmów działania w procesach komórkowych. Ze względu na swoją specyficzność linia ACT-1 odgrywa kluczową rolę zarówno w testach biochemicznych, jak i badaniach immunofluorescencyjnych, w których wykorzystuje się przeciwciała monoklonalne przeciwko aktynie do mapowania strukturalnych domen aktyny oraz oceny roli regulacyjnej białek wiążących aktynę w architekturze komórkowej.
- Chusteczka
- Hybrydoma
- Synonimy
- Act I
- ACT 1
- ACT I
02Klasyfikacja
- Organizm
- Mysz
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobne do limfoblastów
- Typ komórki
- Komórki śledziony poddano fuzji z komórkami szpiczaka NS-1
04Identyfikatory
- Źródło
- ACT-1 (numer katalogowy Cytion 305461)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4499
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja białek
- Immunoglobulina monoklonalna (IgG1) skierowana przeciwko aktynom Dictyostelium discoideum
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
