ACT-1

La linea cellulare ACT-1 deriva da un ceppo del fungo mucillaginoso Dictyostelium discoideum, che costituisce un prezioso modello per lo studio delle dinamiche dell’actina e della motilità cellulare. Nel Dictyostelium, l’actina svolge un ruolo fondamentale nell’organizzazione del citoscheletro, in particolare nel processo di chemiotassi e nell’aggregazione cellulare in condizioni di carenza di nutrienti. La linea cellulare ACT-1 è stata essenziale per analizzare le interazioni degli anticorpi monoclonali con l’actina, soprattutto per distinguere specifiche regioni di legame sui monomeri di actina e per valutare le risposte strutturali e funzionali dell’actina a varie interazioni molecolari. Gli studi condotti utilizzando ACT-1 hanno contribuito in modo significativo alla comprensione di come le regioni amino-terminali dell’actina interagiscano con gli anticorpi e influenzino la polimerizzazione dell’actina, evidenziando le regioni cruciali per le transizioni da monomero a filamento e per la stabilizzazione.

In particolare, ACT-1 è stata utilizzata per esaminare anticorpi monoclonali in grado di impedire la polimerizzazione dell’actina legandosi selettivamente alle forme monomeriche dell’actina. Questo legame inibisce la formazione di filamenti stabilizzando l’actina nel suo stato monomerico, il che riduce la lunghezza dei filamenti e la viscosità quando viene introdotta in filamenti di actina già esistenti. Questi effetti sono utili per lo studio delle proteine che regolano l’actina e dei loro meccanismi nei processi cellulari. Data la sua specificità, la linea ACT-1 è fondamentale sia per i test biochimici che per gli studi di immunofluorescenza, che utilizzano anticorpi monoclonali anti-actina per mappare i domini strutturali dell’actina e valutare i ruoli regolatori delle proteine leganti l’actina nell’architettura cellulare.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia