الانتقال إلى المحتوى
ACT-1
الأنسجة
الورم المهجن
المرادفات
Act I, ACT 1, ACT I

المستندات

ACT-1

Cell line · رقم المنتج 305461

The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

ينحدر خط الخلايا ACT-1 من سلالة من الفطر اللزج Dictyostelium discoideum، الذي يُعد نموذجًا قيّمًا لدراسة ديناميكيات الأكتين وحركة الخلايا. في Dictyostelium، يلعب الأكتين دورًا محوريًا في تنظيم الهيكل الخلوي، لا سيما في عملية الكيميائي التوجه والتكتل الخلوي في ظل نقص المغذيات. وقد كان خط الخلايا ACT-1 أساسيًا لتحليل تفاعلات الأجسام المضادة أحادية النسيلة مع الأكتين، خاصة في تمييز مناطق الارتباط المحددة على مونومرات الأكتين وتقييم الاستجابات الهيكلية والوظيفية للأكتين لمختلف التفاعلات الجزيئية. وقد ساهمت الدراسات التي استخدمت ACT-1 بشكل كبير في فهم كيفية تفاعل المناطق الأمينية الطرفية للأكتين مع الأجسام المضادة وتأثيرها على بلمرة الأكتين، مما سلط الضوء على المناطق الحاسمة لعمليات الانتقال من المونومرات إلى الخيوط واستقرارها.

وعلى وجه الخصوص، استُخدمت ACT-1 لفحص الأجسام المضادة أحادية النسيلة التي يمكنها منع بلمرة الأكتين من خلال الارتباط الانتقائي بأشكال الأكتين الأحادية. ويؤدي هذا الارتباط إلى تثبيط تكوين الخيوط عن طريق تثبيت الأكتين في حالته الأحادية، مما يقلل من طول الخيوط ولزوجتها عند إدخالها إلى خيوط الأكتين الموجودة. هذه التأثيرات مفيدة لدراسة البروتينات المنظمة للأكتين وآليات عملها في العمليات الخلوية. ونظرًا لخصوصيتها، فإن سلالة ACT-1 تلعب دورًا أساسيًّا في كل من الاختبارات الكيميائية الحيوية ودراسات المناعة الفلورية، التي تستخدم الأجسام المضادة أحادية النسيلة المضادة للأكتين لرسم خرائط للمجالات الهيكلية للأكتين وتقييم الأدوار التنظيمية للبروتينات المرتبطة بالأكتين في البنية الخلوية.

الأنسجة
الورم المهجن
المرادفات
  • Act I
  • ACT 1
  • ACT I

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا اللمفاوية الشبيهة بالأرومة اللمفاوية
نوع الخلية
تم دمج خلايا الطحال مع خلايا المايلوما NS-1

04المعرّفات

المرجع
ACT-1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305461)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_4499

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
الغلوبولين المناعي أحادي النسيلة (IgG1) المضاد لأكتينات Dictyostelium discoideum

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.1 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.