Премини към съдържанието
ACT-1
Тъкан
Хибридома
Синоними
Act I, ACT 1, ACT I

Документи

ACT-1

Cell line · Номер на продукта 305461

The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия ACT-1 произхожда от щам на слизестата плесен Dictyostelium discoideum, която служи като ценен модел за изучаване на динамиката на актина и клетъчната подвижност. При Dictyostelium актинът играе ключова роля в организацията на цитоскелета, особено в процеса на хемотаксис и клетъчна агрегация при липса на хранителни вещества. Клетъчната линия ACT-1 е била от съществено значение за анализиране на взаимодействията на моноклоналните антитела с актина, особено при разграничаването на специфични области на свързване върху актиновите мономери и при оценката на структурните и функционалните реакции на актина към различни молекулни взаимодействия. Изследванията, използващи ACT-1, са допринесли значително за разбирането на това как аминотерминалните региони на актина взаимодействат с антитела и влияят върху полимеризацията на актина, като подчертават регионите, които са от решаващо значение за прехода от мономери към филаменти и за стабилизацията.

По-конкретно, ACT-1 е използвана за изследване на моноклонални антитела, които могат да предотвратят полимеризацията на актина чрез селективно свързване с мономерните форми на актина. Това свързване инхибира образуването на филаменти, като стабилизира актина в мономерно състояние, което намалява дължината и вискозитета на филаментите, когато антителата се въведат в съществуващи актинови филаменти. Тези ефекти са полезни за изучаване на протеините, регулиращи актина, и техните механизми в клетъчните процеси. Предвид своята специфичност, линията ACT-1 е от ключово значение както за биохимични анализи, така и за имунофлуоресцентни изследвания, които използват моноклонални антитела срещу актина за картиране на структурните домени на актина и оценка на регулаторната роля на протеините, свързващи се с актина, в клетъчната архитектура.

Тъкан
Хибридома
Синоними
  • Act I
  • ACT 1
  • ACT I

02Класификация

Организъм
Мишка
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Лимфобластно-подобни
Тип клетка
Клетките от далака бяха слити с миеломни клетки NS-1

04Идентификатори

Източник
ACT-1 (каталожен номер на Cytion 305461)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_4499

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Моноклонален имуноглобулин (IgG1) срещу актини на Dictyostelium discoideum

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,1 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Съберете суспендираните клетки в 15-милилитрова епруветка и внимателно промийте прилепналите клетки с PBS без калций и магнезий (използвайте 3-5 ml за колби Т25 и 5-10 ml за колби Т75). Нанесете Accutase (1-2 ml за колби T25 и 2,5 ml за колби T75), като се уверите, че покрива изцяло клетъчния слой. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 10 минути. След инкубацията комбинирайте и центрофугирайте суспензията и адхезивните клетки. След центрофугирането внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета и прехвърлете клетъчната суспензия в нови колби, съдържащи свежа среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.