Preskoči na vsebino
ACT-1
Tkivo
Hibridoma
Sinonimi
Act I, ACT 1, ACT I

Dokumenti

ACT-1

Cell line · Številka izdelka 305461

The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija ACT-1 izhaja iz seva sluzovke Dictyostelium discoideum, ki služi kot dragocen model za preučevanje dinamike aktina in celične motilnosti. Pri Dictyosteliumu ima aktin ključno vlogo pri organizaciji citoскеletne mreže, zlasti v procesu kemotaksije in celične agregacije ob pomanjkanju hranil. Celična linija ACT-1 je bila ključnega pomena za analizo interakcij monoklonskih protiteles z aktinom, zlasti pri razlikovanju specifičnih vezavnih regij na aktinskih monomerih ter pri ocenjevanju strukturnih in funkcionalnih odzivov aktina na različne molekularne interakcije. Študije z uporabo linije ACT-1 so pomembno prispevale k razumevanju, kako aminoterminalni deli aktina interagirajo z antitelesi in vplivajo na polimerizacijo aktina, pri čemer so poudarile regije, ki so ključne za prehod iz monomerov v filamente ter za stabilizacijo.

Zlasti se je linija ACT-1 uporabljala za preučevanje monoklonskih protiteles, ki lahko preprečijo polimerizacijo aktina s selektivnim vezanjem na monomerne oblike aktina. To vezanje zavira nastajanje filamentov s stabilizacijo aktina v njegovem monomernem stanju, kar zmanjša dolžino filamentov in viskoznost, ko se vnese v obstoječe aktinske filamente. Ti učinki so koristni za preučevanje proteinov, ki uravnavajo aktin, in njihovih mehanizmov v celičnih procesih. Glede na svojo specifičnost je linija ACT-1 ključna tako za biokemične analize kot za imunofluorescenčne študije, ki uporabljajo monoklonska protitelesa proti aktinu za kartiranje strukturnih domen aktina in oceno regulativnih vlog proteinov, ki se vežejo na aktin, v celični arhitekturi.

Tkivo
Hibridoma
Sinonimi
  • Act I
  • ACT 1
  • ACT I

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Limfoblastom podobni
Vrsta celice
Celice vranice so bile združene s celicami mieloma NS-1

04Identifikatorji

Navajanje vira
ACT-1 (kataloška številka Cytion 305461)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4499

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Monoklonski imunoglobulin (IgG1) proti aktinom vrste Dictyostelium discoideum

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
V 15 ml epruveti zberite suspenzijske celice in jih nežno sperite s PBS brez kalcija in magnezija (uporabite 3-5 ml za bučke T25 in 5-10 ml za bučke T75). Uporabite Accutase (1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75), tako da popolnoma prekrijete plast celic. Počakajte, da se celice inkubirajo pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji združite in centrifugirajte suspenzijo in adherentne celice. Po centrifugiranju previdno ponovno suspendirajte celično peleto in celično suspenzijo prenesite v nove bučke s svežim gojiščem.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.