ACT-1
Cell line · Product number 305461
The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...
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01General information
- Description
ACT-1 細胞系源自一株盤狀網柄菌（Dictyostelium discoideum）菌株，該菌株是研究肌動蛋白動力學與細胞運動性的寶貴模型。 在網狀菌中，肌動蛋白在細胞骨架的組織中扮演著關鍵角色，特別是在營養匱乏下的趨化作用與細胞聚集過程中。 ACT-1 細胞系對於分析單克隆抗體與肌動蛋白的相互作用至關重要，特別是在區分肌動蛋白單體上的特定結合區域，以及評估肌動蛋白對各種分子相互作用的結構和功能反應方面。 利用 ACT-1 進行的研究，對理解肌動蛋白的氨基端區域如何與抗體相互作用並影響肌動蛋白聚合，做出了重大貢獻，並突顯了對單體轉變為絲狀體及穩定化至關重要的區域。
特別是，ACT-1 已被用於研究那些能透過選擇性結合肌動蛋白單體形式來抑制肌動蛋白聚合的單克隆抗體。這種結合會將肌動蛋白穩定於單體狀態，從而抑制絲狀結構的形成；當其引入現有的肌動蛋白絲時，則會減少絲狀結構的長度與黏度。 這些效應對於研究肌動蛋白調節蛋白及其在細胞過程中的作用機制頗具價值。鑑於其特異性，ACT-1 系對於生化檢測及免疫螢光研究皆至關重要；這兩類研究皆利用抗肌動蛋白單克隆抗體來繪製肌動蛋白的結構域，並評估肌動蛋白結合蛋白在細胞結構中的調節作用。
- Tissue
- 雜交瘤
- Synonyms
- Act I
- ACT 1
- ACT I
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 淋巴母細胞樣
- Cell type
- 脾臟細胞與 NS-1 骨髓瘤細胞進行了融合
04Identifiers
- Citation
- ACT-1（Cytion 型號 305461）
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4499
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- 針對盤狀網柄菌（Dictyostelium discoideum）肌動蛋白的單克隆免疫球蛋白（IgG1）
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，含 2.1 mM 穩定型谷氨醯胺，含 2.0 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820700a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 將懸浮細胞收集至 15 毫升試管中，並用不含鈣和鎂的 PBS 輕柔地洗滌貼壁細胞（T25 培養瓶使用 3-5 毫升，T75 培養瓶使用 5-10 毫升）。 加入 Accutase（T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶使用 2.5 毫升），確保完全覆蓋細胞層。讓細胞於室溫下孵育 10 分鐘。 孵育完成後，將懸浮細胞與貼壁細胞合併並進行離心。離心後，小心地將細胞沉澱重新懸浮，並將細胞懸液轉移至裝有新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes