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CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

카키-1 세포

Cell line · 제품 번호 300149

Caki-1 세포주는 인간 신장 투명세포암의 전이 부위에서 유래되었습니다. 이 세포주는 신장 정맥 벽에 위치한 종양에서 확립되었으며...

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01일반 정보

설명

Caki-1 세포주는 인간 신장 투명 세포 암종의 전이 부위에서 추출한 것입니다. 남성 환자의 신장 정맥 벽에 위치한 종양에서 확립된 Caki-1 세포는 신장암 생물학 연구, 특히 투명 세포 신장 세포 암종(ccRCC)의 기저 메커니즘을 이해하는 데 일반적으로 사용됩니다. 이 세포주는 형태학적으로 상피와 유사하고 시험관 내에서 강력한 성장 특성을 나타내므로 약물 스크리닝 및 분자 생물학 연구를 포함한 다양한 실험 기법에 적합합니다.

카키-1은 특히 63~71개의 변이가 있는 68개의 모달 염색체 수가 특징인 복잡한 핵형으로 주목할 만합니다. 이 이수성 염색체 구성은 특정 이상이 있는 삼배체 범위를 강조하며, 특히 남성 유래 종양 세포주에서는 드물게 Y 염색체가 결여되어 있습니다. 이 세포주는 여러 마커 염색체와 염색체 N5, N9, N10, N16, N19의 변화를 포함한 여러 염색체 이상을 보여 암 연구에서의 유용성에 기여하고 있습니다.

종양원성 측면에서 Caki-1은 누드 마우스에서 종양을 형성할 수 있으며 신장 원발성 종양의 병리를 반영하는 투명 세포 암종을 일관되게 생성하는 것으로 보고되었습니다. 이러한 특성으로 인해 신장암 전이 및 종양 생물학에 대한 생체 내 연구에 매우 유용한 모델입니다. 이 세포주는 또한 실험 환경에서 피부로 전이되는 것이 관찰되었습니다. 생화학적 관점에서 볼 때, Caki-1은 혈액형 O, Rh- 및 HLA 유형 A9, B12, Bw35를 포함한 다양한 동종 효소 및 항원을 발현합니다. 동종 효소 프로파일링에는 암 진행 및 치료에 대한 반응과 관련된 세포 대사 및 유전자 발현 연구와 관련이 있을 수 있는 AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 및 PGM3가 포함됩니다.

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  • CAKI-1
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  • Caki1

02분류

생물체
인간
성
남성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사
종양 유발성
예, 누드 마우스에서

04식별자

인용
Caki-1(사이티온 카탈로그 번호 300149)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_0234

05취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
2 x 10⁴ 세포/cm²를 권장합니다
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

07기부자

기증자 연령
49년
민족
백인