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Cellule Kasumi-1
Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia mieloblastica acuta
Sinonimi
KASUMI-1, Kasumi 1, KASUMI1, Kasumi1

Documenti

Cellule Kasumi-1

Cell line · Codice prodotto 300226

La linea cellulare Kasumi-1 è stata ottenuta dal sangue periferico di un bambino giapponese di 7 anni affetto da leucemia mieloide acuta (LMA), in particolare dal sottotipo FAB M2...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Kasumi-1 è stata derivata dal sangue periferico di un bambino giapponese di 7 anni affetto da leucemia mieloide acuta (AML), nello specifico dal sottotipo FAB M2, durante una ricaduta dopo un trapianto di midollo osseo. Questa linea cellulare è una risorsa preziosa per i ricercatori che studiano le neoplasie ematologiche, in particolare quelle che coinvolgono la traslocazione cromosomica t(8;21). Questa traslocazione porta alla formazione del gene di fusione AML1-ETO, un fattore critico in alcuni sottotipi di AML. Le cellule Kasumi-1 sono quindi un modello essenziale per studiare i meccanismi molecolari dell'AML e testare potenziali approcci terapeutici.

Le cellule Kasumi-1 possiedono caratteristiche di entrambi i lignaggi mieloide e macrofago, che le rendono particolarmente utili per gli studi sulla differenziazione mieloide. Queste cellule possono essere indotte a differenziarsi in cellule simili ai macrofagi quando vengono coltivate con il forbolo 12-miristato 13-acetato (TPA), fornendo un sistema robusto per esplorare le vie coinvolte nell'impegno e nel differenziamento del lignaggio mieloide. Questa capacità di differenziazione aumenta l'utilità delle cellule Kasumi-1 nella ricerca incentrata sia sulla biologia dell'AML sia sui processi di sviluppo delle cellule mieloidi in senso lato.

Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia mieloblastica acuta
Sinonimi
  • KASUMI-1
  • Kasumi 1
  • KASUMI1
  • Kasumi1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Cellule rotonde che presentano marcate variazioni sia nelle dimensioni che nel rapporto nucleare-citoplasmatico.
Tipo di cellula
Mieloblasto (AML-leucemia mieloide acuta)
Cariotipo
Traslocazione cromosomica T(8,21)
Tempo di raddoppio
da 40 a 45 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Kasumi-1 (numero di catalogo Cytion 300226)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0589

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
CD4+ (37,1%, coespresso con CD34 e CD33), CD13+(OKM13), CD15+(LeuM1), CD33+, CD34+(MY10), CD38+(OKT10, 50,1%), CD71+(Nu-TERf), HLA-DR+(OKDR).

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Densità di semina
1 x 105 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
Aggiungere terreno fresco (20-30% in volume) ogni 2 o 3 giorni
Recupero post-scongelamento
Circa una settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
7 anni
Etnia
Giapponese