Gå til innholdet
ACT-1
Vev
Hybridom
Synonymer
Act I, ACT 1, ACT I

Dokumenter

ACT-1

Cell line · Produktnummer 305461

The ACT-1 cell line originates from a strain of the slime mold Dictyostelium discoideum, which serves as a valuable model for studying actin dynamics and ...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

ACT-1-cellelinjen stammer fra en stamme av slimformen Dictyostelium discoideum, som fungerer som en verdifull modell for å studere aktindynamikk og cellulær bevegelighet. I Dictyostelium spiller aktin en sentral rolle i organiseringen av cytoskelettet, særlig i prosessen med kjemotaksi og cellulær aggregering under næringsmangel. ACT-1-cellelinjen har vært avgjørende for å analysere interaksjoner mellom monoklonale antistoffer og aktin, spesielt for å skille mellom spesifikke bindingsregioner på aktinmonomerer og for å vurdere aktins strukturelle og funksjonelle responser på ulike molekylære interaksjoner. Studier ved bruk av ACT-1 har bidratt betydelig til forståelsen av hvordan aktins aminoterminale regioner interagerer med antistoffer og påvirker aktinpolymerisasjonen, og har fremhevet regioner som er avgjørende for overgangen fra monomer til filament og stabilisering.

Spesielt har ACT-1 blitt brukt til å undersøke monoklonale antistoffer som kan forhindre aktinpolymerisering ved å binde seg selektivt til monomere former av aktin. Denne bindingen hemmer filamentdannelse ved å stabilisere aktin i sin monomere tilstand, noe som reduserer filamentlengden og viskositeten når det tilføres eksisterende aktinfilamenter. Disse effektene er nyttige for å studere aktinregulerende proteiner og deres virkningsmekanismer i cellulære prosesser. På grunn av sin spesifisitet er ACT-1-linjen avgjørende både for biokjemiske analyser og immunfluorescensstudier, der man bruker monoklonale anti-aktin-antistoffer for å kartlegge strukturelle aktindomener og vurdere de regulatoriske rollene til aktinbindende proteiner i cellearkitekturen.

Vev
Hybridom
Synonymer
  • Act I
  • ACT 1
  • ACT I

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblastlignende
Celletype
Miltceller ble fusjonert med NS-1-myelomceller

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ACT-1 (Cytion-katalognummer 305461)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4499

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Monoklonalt immunoglobulin (IgG1) mot aktiner fra Dictyostelium discoideum

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,1 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Samle suspensjonscellene i et 15 ml rør, og vask de adherente cellene forsiktig med PBS uten kalsium og magnesium (bruk 3-5 ml for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml for T25-kolber, 2,5 ml for T75-kolber) og sørg for full dekning av cellelaget. La cellene inkubere i romtemperatur i 10 minutter. Etter inkubasjon kombineres og sentrifugeres både suspensjonen og de adherente cellene. Etter sentrifugering resuspenderes cellepelleten forsiktig, og cellesuspensjonen overføres til nye kolber som inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.