ACT-1

La línea celular ACT-1 procede de una cepa del moho mucilaginoso Dictyostelium discoideum, que constituye un valioso modelo para el estudio de la dinámica de la actina y la motilidad celular. En Dictyostelium, la actina desempeña un papel fundamental en la organización del citoesqueleto, especialmente en el proceso de quimiotaxis y en la agregación celular en condiciones de privación de nutrientes. La línea celular ACT-1 ha resultado esencial para analizar las interacciones de los anticuerpos monoclonales con la actina, especialmente a la hora de distinguir regiones de unión específicas en los monómeros de actina y evaluar las respuestas estructurales y funcionales de la actina ante diversas interacciones moleculares. Los estudios realizados con ACT-1 han contribuido de manera significativa a comprender cómo las regiones amino-terminales de la actina interactúan con los anticuerpos e influyen en la polimerización de la actina, poniendo de relieve las regiones cruciales para las transiciones de monómero a filamento y para la estabilización.

En particular, la línea ACT-1 se ha utilizado para examinar anticuerpos monoclonales capaces de impedir la polimerización de la actina al unirse selectivamente a las formas monoméricas de la actina. Esta unión inhibe la formación de filamentos al estabilizar la actina en su estado monomérico, lo que reduce la longitud y la viscosidad de los filamentos cuando se introduce en filamentos de actina ya existentes. Estos efectos resultan útiles para estudiar las proteínas reguladoras de la actina y sus mecanismos en los procesos celulares. Dada su especificidad, la línea ACT-1 resulta fundamental tanto para ensayos bioquímicos como para estudios de inmunofluorescencia, en los que se utilizan anticuerpos monoclonales anti-actina para cartografiar los dominios estructurales de la actina y evaluar las funciones reguladoras de las proteínas de unión a la actina en la arquitectura celular.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía