الانتقال إلى المحتوى
A2058
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني الأميلاني
موقع الانتشار
العقدة اللمفاوية
المرادفات
A 2058, A-2058

المستندات

A2058

Cell line · رقم المنتج 305046

The A2058 cell line is a human melanoma cell line derived from a brain metastasis of a patient with malignant melanoma. This cell line is widely used in c...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط الخلايا A2058 هو خط خلايا الورم الميلانيني البشري المشتق من ورم خبيث في الدماغ لمريض مصاب بالورم الميلانيني الخبيث. ويُستخدم هذا الخط الخلوي على نطاق واسع في أبحاث السرطان نظراً لقدرته العالية على الانتقال، مما يجعله نموذجاً مهماً لدراسة تطور الورم الميلانيني والآليات الكامنة وراء انتشاره. من المعروف أن خلايا A2058 تعبر عن مستقبلات عامل النمو العصبي (NGF)، والتي ترتبط بخصائصها العدوانية والنقائل.

وتتمثل إحدى السمات الرئيسية لخلايا A2058 في قدرتها على إنتاج عوامل النمو التحويلية (TGFs) التي تعزز النمو المستقل عن الثبات، وهو مؤشر شائع للنمط الظاهري السرطاني المتحول. تتفاعل هذه العوامل مع مستقبلات عامل نمو البشرة (EGF)، على الرغم من افتقار الخلايا نفسها لمستقبلات عامل النمو EGF التي يمكن اكتشافها. ويُعد هذا التفاعل أمرًا بالغ الأهمية لتمكين نمو الخلايا الليفية الطبيعية والخلايا الظهارية في أجار لين، وهو اختبار قياسي لتقييم إمكانية تحول الخلايا السرطانية. وتسلط قدرة A2058 على تحفيز هذا النمو الضوء على فائدته في الأبحاث التي تركز على فهم ومكافحة انتشار الورم الميلانيني.

الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني الأميلاني
موقع الانتشار
العقدة اللمفاوية
المرادفات
  • A 2058
  • A-2058

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
زمن المضاعفة
27 ساعة

04المعرّفات

المرجع
A2058 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305046)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1059

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
43 سنة
الأصل العرقي
أوروبي