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A2058
Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma amelanótico
Lugar de metástasis
Ganglio linfático
Sinónimos
A 2058, A-2058

Documentos

A2058

Cell line · Número de producto 305046

The A2058 cell line is a human melanoma cell line derived from a brain metastasis of a patient with malignant melanoma. This cell line is widely used in c...

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01Información general

Descripción

La línea celular A2058 es una línea celular de melanoma humano derivada de una metástasis cerebral de un paciente con melanoma maligno. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer debido a su alto potencial metastásico, lo que la convierte en un modelo importante para estudiar la progresión del melanoma y los mecanismos subyacentes a la metástasis. Se sabe que las células A2058 expresan receptores del factor de crecimiento nervioso (NGF), que están relacionados con sus características agresivas y metastásicas.

Una de las características clave de las células A2058 es su capacidad para producir factores de crecimiento transformantes (TGF) que promueven el crecimiento independiente del anclaje, un indicador común del fenotipo transformado y canceroso. Estos TGF interactúan con los receptores del factor de crecimiento epidérmico (EGF), a pesar de que las propias células carecen de receptores EGF detectables. Esta interacción es crítica para permitir el crecimiento de fibroblastos normales y células epiteliales en agar blando, un ensayo estándar para evaluar el potencial de transformación de las células cancerosas. La capacidad del A2058 para impulsar dicho crecimiento pone de relieve su utilidad en la investigación centrada en comprender y combatir la propagación del melanoma.

Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma amelanótico
Lugar de metástasis
Ganglio linfático
Sinónimos
  • A 2058
  • A-2058

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial
Tiempo de duplicación
27 horas

04Identificadores

Referencia
A2058 (número de catálogo de Cytion 305046)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1059

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
43 años
Origen étnico
Europea