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A2058
ティッシュ
皮膚
病気
無色素性黒色腫
転移部位
リンパ節
同義語
A 2058, A-2058

A2058

Cell line · 製品番号 305046

The A2058 cell line is a human melanoma cell line derived from a brain metastasis of a patient with malignant melanoma. This cell line is widely used in c...

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01概要

説明

A2058細胞株は、悪性黒色腫患者の脳転移に由来するヒト黒色腫細胞株である。この細胞株は、その高い転移能により、がん研究に広く用いられており、メラノーマの進行や転移の基礎となるメカニズムを研究するための重要なモデルとなっている。A2058細胞は神経成長因子(NGF)レセプターを発現することが知られており、このレセプターはその攻撃性と転移性に関連している。

A2058細胞の重要な特徴の一つは、形質転換した癌の表現型の一般的な指標であるアンカレッジ非依存性増殖を促進する形質転換成長因子(TGF)を産生する能力である。これらのTGFは、細胞自体には検出可能なEGFレセプターがないにもかかわらず、上皮成長因子(EGF)レセプターと相互作用する。この相互作用は、がん細胞の形質転換能を評価するための標準的なアッセイ法である軟寒天培地において、正常な線維芽細胞や上皮細胞の増殖を可能にするために重要である。このような成長を促進するA2058の能力は、メラノーマの理解と拡散防止に焦点を当てた研究における有用性を強調している。

ティッシュ
皮膚
病気
無色素性黒色腫
転移部位
リンパ節
同義語
  • A 2058
  • A-2058

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮
倍増時間
27時間

04識別子

引用
A2058 (Cytion カタログ番号 305046)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1059

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
43年
民族
ヨーロピアン