Gå til innholdet
A2058
Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Lymfeknute
Synonymer
A 2058, A-2058

Dokumenter

A2058

Cell line · Produktnummer 305046

The A2058 cell line is a human melanoma cell line derived from a brain metastasis of a patient with malignant melanoma. This cell line is widely used in c...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

A2058-cellelinjen er en human melanomcellelinje som stammer fra en hjernemetastase fra en pasient med malignt melanom. Denne cellelinjen er mye brukt i kreftforskning på grunn av sitt høye metastaseringspotensial, noe som gjør den til en viktig modell for å studere melanomprogresjon og mekanismene som ligger til grunn for metastasering. Det er kjent at A2058-celler uttrykker reseptorer for nervevekstfaktor (NGF), som er knyttet til deres aggressive og metastatiske egenskaper.

Et av de viktigste kjennetegnene ved A2058-celler er deres evne til å produsere transformative vekstfaktorer (TGF) som fremmer forankringsuavhengig vekst, en vanlig indikator på den transformerte kreftfenotypen. Disse TGF-ene interagerer med reseptorer for epidermal vekstfaktor (EGF), til tross for at cellene selv mangler påvisbare EGF-reseptorer. Denne interaksjonen er avgjørende for å muliggjøre vekst av normale fibroblaster og epitelceller i myk agar, et standard assay for å evaluere transformasjonspotensialet til kreftceller. A2058s evne til å drive frem slik vekst viser hvor nyttig den er i forskning som fokuserer på å forstå og bekjempe spredning av melanom.

Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Lymfeknute
Synonymer
  • A 2058
  • A-2058

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Fordoblingstid
27 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A2058 (Cytion-katalognummer 305046)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1059

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
43 år
Etnisitet
Europeisk