Zum Inhalt springen
A2058
Gewebe
Haut
Krankheit
Amelanotisches Melanom
Metastasenherd
Lymphknoten
Synonyme
A 2058, A-2058

Dokumente

A2058

Cell line · Artikelnummer 305046

The A2058 cell line is a human melanoma cell line derived from a brain metastasis of a patient with malignant melanoma. This cell line is widely used in c...

€430.00zzgl. MwSt. und Versandkosten
Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die A2058-Zelllinie ist eine humane Melanom-Zelllinie, die aus einer Hirnmetastase eines Patienten mit malignem Melanom stammt. Diese Zelllinie wird aufgrund ihres hohen Metastasierungspotenzials häufig in der Krebsforschung eingesetzt und ist daher ein wichtiges Modell für die Untersuchung des Fortschreitens des Melanoms und der der Metastasierung zugrunde liegenden Mechanismen. A2058-Zellen sind dafür bekannt, dass sie Rezeptoren für den Nervenwachstumsfaktor (NGF) exprimieren, die mit ihren aggressiven und metastatischen Eigenschaften in Verbindung gebracht werden.

Eines der Hauptmerkmale der A2058-Zellen ist ihre Fähigkeit, transformierende Wachstumsfaktoren (TGFs) zu produzieren, die das verankerungsunabhängige Wachstum fördern, ein allgemeiner Indikator für den transformierten, krebsartigen Phänotyp. Diese TGFs interagieren mit Rezeptoren des epidermalen Wachstumsfaktors (EGF), obwohl die Zellen selbst keine EGF-Rezeptoren nachweisen können. Diese Wechselwirkung ist entscheidend für das Wachstum normaler Fibroblasten und Epithelzellen in Softagar, einem Standardtest zur Bewertung des Transformationspotenzials von Krebszellen. Die Fähigkeit von A2058, ein solches Wachstum anzuregen, unterstreicht seinen Nutzen für die Forschung, die sich auf das Verständnis und die Bekämpfung der Ausbreitung des Melanoms konzentriert.

Gewebe
Haut
Krankheit
Amelanotisches Melanom
Metastasenherd
Lymphknoten
Synonyme
  • A 2058
  • A-2058

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Verdopplungszeit
27 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
A2058 (Cytion Katalognummer 305046)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1059

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
43 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch