Siirry sisältöön
A2058
Kudos
Iho
Sairaus
Amelanoottinen melanooma
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
A 2058, A-2058

Asiakirjat

A2058

Cell line · Tuotenumero 305046

The A2058 cell line is a human melanoma cell line derived from a brain metastasis of a patient with malignant melanoma. This cell line is widely used in c...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

A2058-solulinja on ihmisen melanoomasolulinja, joka on peräisin pahanlaatuista melanoomaa sairastavan potilaan aivometastaasista. Tätä solulinjaa käytetään laajalti syöpätutkimuksessa sen suuren etäpesäkepotentiaalin vuoksi, mikä tekee siitä tärkeän mallin melanooman etenemisen ja etäpesäkkeiden taustalla olevien mekanismien tutkimiseen. A2058-solujen tiedetään ilmentävän hermokasvutekijän (NGF) reseptoreita, jotka liittyvät niiden aggressiivisiin ja metastaattisiin ominaisuuksiin.

Yksi A2058-solujen tärkeimmistä ominaisuuksista on niiden kyky tuottaa transformoivia kasvutekijöitä (TGF), jotka edistävät ankkuroitumisesta riippumatonta kasvua, mikä on yleinen indikaattori transformoituneesta, syöpäfenotyypistä. Nämä TGF:t ovat vuorovaikutuksessa epidermisen kasvutekijän (EGF) reseptorien kanssa, vaikka soluilla itsellään ei ole havaittavia EGF-reseptoreita. Tämä vuorovaikutus on ratkaisevan tärkeää, jotta normaalit fibroblastit ja epiteelisolut voivat kasvaa pehmeässä agarissa, joka on tavanomainen määritysmenetelmä syöpäsolujen muuntumispotentiaalin arvioimiseksi. A2058:n kyky edistää tällaista kasvua korostaa sen hyödyllisyyttä tutkimuksessa, jossa keskitytään melanooman leviämisen ymmärtämiseen ja torjuntaan.

Kudos
Iho
Sairaus
Amelanoottinen melanooma
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
  • A 2058
  • A-2058

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
27 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
A2058 (Cytionin luettelonumero 305046)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1059

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
43 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen