Skip to content
A2058
Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมาชนิดไม่มีสีเมลานิน
Metastatic site
ต่อมน้ำเหลือง
Synonyms
A 2058, A-2058

Documents

A2058

Cell line · Product number 305046

The A2058 cell line is a human melanoma cell line derived from a brain metastasis of a patient with malignant melanoma. This cell line is widely used in c...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ A2058 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมาของมนุษย์ที่ได้มาจากมะเร็งที่แพร่กระจายไปยังสมองของผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งเมลาโนมาชนิดร้ายแรง เซลล์ไลน์นี้ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยมะเร็งเนื่องจากมีศักยภาพในการแพร่กระจายสูง ซึ่งทำให้เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาการลุกลามของมะเร็งเมลาโนมาและกลไกที่อยู่เบื้องหลังการแพร่กระจาย เซลล์ A2058 เป็นที่ทราบกันว่ามีตัวรับของปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF) ซึ่งเชื่อมโยงกับลักษณะที่ก้าวร้าวและแพร่กระจายของเซลล์เหล่านี้

หนึ่งในคุณสมบัติสำคัญของเซลล์ A2058 คือความสามารถในการผลิตตัวกระตุ้นการเจริญเติบโตที่เปลี่ยนแปลง (TGF) ซึ่งส่งเสริมการเจริญเติบโตที่ไม่ขึ้นกับการยึดเกาะ ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ทั่วไปของลักษณะที่เปลี่ยนแปลงไปและมะเร็ง เซลล์เหล่านี้มีปฏิสัมพันธ์กับตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGF) แม้ว่าเซลล์เองจะไม่มีตัวรับ EGF ที่สามารถตรวจพบได้ก็ตามปฏิสัมพันธ์นี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการส่งเสริมการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสต์ปกติและเซลล์เยื่อบุผิวในวุ้นอ่อน ซึ่งเป็นวิธีมาตรฐานในการประเมินศักยภาพการเปลี่ยนแปลงของเซลล์มะเร็ง ความสามารถของ A2058 ในการกระตุ้นการเจริญเติบโตดังกล่าวเน้นย้ำถึงประโยชน์ของมันในการวิจัยที่มุ่งเน้นการทำความเข้าใจและต่อสู้กับการแพร่กระจายของมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา

Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมาชนิดไม่มีสีเมลานิน
Metastatic site
ต่อมน้ำเหลือง
Synonyms
  • A 2058
  • A-2058

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Doubling time
27 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
A2058 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305046)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1059

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
43 ปี
Ethnicity
ยุโรป