Tartalomra ugrás
A2058
Szövet
Bőr
Betegség
Amelanotikus melanoma
Áttétes hely
Nyirokcsomó
Szinonimák
A 2058, A-2058

Dokumentumok

A2058

Cell line · Termékszám 305046

The A2058 cell line is a human melanoma cell line derived from a brain metastasis of a patient with malignant melanoma. This cell line is widely used in c...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az A2058 sejtvonal egy humán melanoma sejtvonal, amely egy rosszindulatú melanomás beteg agyi metasztázisából származik. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban nagy metasztatikus potenciálja miatt, ami fontos modellé teszi a melanoma progressziójának és az áttétképződés hátterében álló mechanizmusok tanulmányozásához. Az A2058 sejtekről ismert, hogy expresszálják az idegnövekedési faktor (NGF) receptorait, amelyek agresszív és metasztatikus tulajdonságaikhoz kapcsolódnak.

Az A2058 sejtek egyik legfontosabb jellemzője, hogy képesek olyan transzformáló növekedési faktorokat (TGF-ek) termelni, amelyek elősegítik a horgonyzás-független növekedést, ami az átalakult, rákos fenotípus általános mutatója. Ezek a TGF-ek kölcsönhatásba lépnek az epidermális növekedési faktor (EGF) receptorokkal, annak ellenére, hogy maguk a sejtek nem rendelkeznek kimutatható EGF-receptorokkal. Ez a kölcsönhatás kritikus fontosságú a normál fibroblasztok és epitélsejtek lágy agarban történő növekedésének lehetővé tételéhez, ami a rákos sejtek transzformációs potenciáljának értékelésére szolgáló standard vizsgálat. Az A2058-nak az a képessége, hogy képes ilyen növekedést előidézni, kiemeli hasznosságát a melanoma terjedésének megértésére és leküzdésére irányuló kutatásokban.

Szövet
Bőr
Betegség
Amelanotikus melanoma
Áttétes hely
Nyirokcsomó
Szinonimák
  • A 2058
  • A-2058

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Kettőzési idő
27 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
A2058 (Cytion katalógusszám: 305046)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1059

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
43 év
Etnikai hovatartozás
Európai