الانتقال إلى المحتوى
Daoy
الأنسجة
المخ، المخيخ
المرض
الورم الأرومي النخاعي
المرادفات
DAOY, D324 Med, D-324 Med, D324 MED, D-324MED, D324

المستندات

Daoy

Cell line · رقم المنتج 305053

The Daoy cell line, established in 1985 by P.F. Jacobsen at the Royal Perth Hospital in Western Australia, is a human cell line derived from a medulloblas...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط خلايا داوي، الذي أنشأه ب. ف. جاكوبسن في مستشفى بيرث الملكي في غرب أستراليا عام 1985، هو خط خلايا بشرية مشتق من ورم أرومي نخاعي، وهو نوع من أورام الدماغ يوجد في الغالب لدى الأطفال. وقد نشأ هذا الخط الخلوي من خزعة من ورم في الحفرة الخلفية لطفل يبلغ من العمر 4 سنوات. عادةً ما توجد الأورام الأرومية النخاعية في المخيخ، وهي منطقة من الدماغ مهمة للتحكم الحركي والتنسيق، وهي أكثر أورام الدماغ الخبيثة شيوعاً لدى الأطفال.

تُستخدم خلايا داوي على نطاق واسع كنظام نموذجي لدراسة بيولوجيا الورم الأرومي النخاعي، بما في ذلك بدء الورم وتطوره واستجابته للعلاجات. وقد كان لخط الخلايا دور فعال في أبحاث الورم الأرومي النخاعي، لا سيما في فهم الأساس الجزيئي والوراثي للمرض، وكذلك في اختبار عوامل العلاج الكيميائي. تُظهر الخلايا السمات النموذجية للأورام الأرومية النخاعية الخبيثة، بما في ذلك معدلات النمو السريع والقدرة على تكوين أورام عند زرعها في فئران منقوصة المناعة. وقد ساهمت الأبحاث التي أجريت باستخدام خط خلايا داوي في تطوير علاجات جديدة محتملة وأهداف علاجية للورم الأرومي النخاعي الأرومي.

الأنسجة
المخ، المخيخ
المرض
الورم الأرومي النخاعي
المرادفات
  • DAOY
  • D324 Med
  • D-324 Med
  • D324 MED
  • D-324MED
  • D324

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
متعدد الأضلاع
زمن المضاعفة
34 ساعة

04المعرّفات

المرجع
داوي (الرقم الكتالوجي لسايتيون 305053)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1167

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
4 سنوات
الأصل العرقي
أوروبي