Μετάβαση στο περιεχόμενο
Daoy
Ιστός
Εγκέφαλος, παρεγκεφαλίδα
Ασθένεια
Μυελοβλάστωμα
Συνώνυμα
DAOY, D324 Med, D-324 Med, D324 MED, D-324MED, D324

Έγγραφα

Daoy

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305053

The Daoy cell line, established in 1985 by P.F. Jacobsen at the Royal Perth Hospital in Western Australia, is a human cell line derived from a medulloblas...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά Daoy, που δημιουργήθηκε το 1985 από τον P.F. Jacobsen στο Βασιλικό Νοσοκομείο του Περθ στη Δυτική Αυστραλία, είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά που προέρχεται από μυελοβλάστωμα, έναν τύπο όγκου του εγκεφάλου που απαντάται κυρίως σε παιδιά. Αυτή η κυτταρική σειρά προήλθε από βιοψία όγκου του οπίσθιου βόθρου σε αγόρι 4 ετών. Τα μυελοβλαστώματα εντοπίζονται συνήθως στην παρεγκεφαλίδα, μια περιοχή του εγκεφάλου ζωτικής σημασίας για τον κινητικό έλεγχο και τον συντονισμό, και είναι οι πιο συχνοί κακοήθεις όγκοι του εγκεφάλου στα παιδιά.

Τα κύτταρα Daoy χρησιμοποιούνται ευρέως ως πρότυπο σύστημα για τη μελέτη της βιολογίας του μυελοβλαστώματος, συμπεριλαμβανομένης της έναρξης του όγκου, της εξέλιξης και της ανταπόκρισης στις θεραπείες. Η κυτταρική σειρά έχει διαδραματίσει καθοριστικό ρόλο στην έρευνα για το μυελοβλάστωμα, ιδίως στην κατανόηση της μοριακής και γενετικής βάσης της νόσου, καθώς και στη δοκιμή χημειοθεραπευτικών παραγόντων. Τα κύτταρα παρουσιάζουν τυπικά χαρακτηριστικά των κακοήθων μυελοβλαστωμάτων, συμπεριλαμβανομένων των ταχέων ρυθμών ανάπτυξης και της ικανότητας σχηματισμού όγκων κατά τη μεταμόσχευση σε ανοσοκατεσταλμένα ποντίκια. Η έρευνα με τη χρήση της κυτταρικής σειράς Daoy έχει συμβάλει στην ανάπτυξη πιθανών νέων θεραπειών και θεραπευτικών στόχων για το μυελοβλάστωμα.

Ιστός
Εγκέφαλος, παρεγκεφαλίδα
Ασθένεια
Μυελοβλάστωμα
Συνώνυμα
  • DAOY
  • D324 Med
  • D-324 Med
  • D324 MED
  • D-324MED
  • D324

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Πολυγωνικό
Χρόνος διπλασιασμού
34 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
Daoy (αριθμός καταλόγου Cytion 305053)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1167

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
4 χρόνια
Εθνικότητα
Ευρωπαϊκό