Preskoči na vsebino
Daoy
Tkivo
Možgani, cerebelum
Bolezen
Meduloblastom
Sinonimi
DAOY, D324 Med, D-324 Med, D324 MED, D-324MED, D324

Dokumenti

Daoy

Cell line · Številka izdelka 305053

The Daoy cell line, established in 1985 by P.F. Jacobsen at the Royal Perth Hospital in Western Australia, is a human cell line derived from a medulloblas...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija Daoy, ki jo je leta 1985 ustanovil P. F. Jacobsen v bolnišnici Royal Perth v Zahodni Avstraliji, je človeška celična linija, pridobljena iz meduloblastoma, vrste možganskega tumorja, ki se večinoma pojavlja pri otrocih. Ta celična linija izvira iz biopsije tumorja zadnjega jamskega polja pri štiriletnem dečku. Medulloblastomi se običajno nahajajo v možgančku, predelu možganov, ki je ključen za motorični nadzor in koordinacijo, in so najpogostejši maligni možganski tumorji pri otrocih.

Celice Daoy se pogosto uporabljajo kot modelni sistem za preučevanje biologije meduloblastoma, vključno z nastankom in napredovanjem tumorja ter odzivom na terapijo. Ta celična linija je bila zelo pomembna pri raziskavah medulloblastoma, zlasti pri razumevanju molekularne in genetske osnove bolezni, pa tudi pri testiranju kemoterapevtikov. Celice imajo tipične značilnosti malignih meduloblastomov, vključno s hitro rastjo in sposobnostjo tvorbe tumorjev ob presaditvi v imunsko oslabljene miši. Raziskave z uporabo celične linije Daoy so prispevale k razvoju morebitnih novih načinov zdravljenja in terapevtskih ciljev za medulloblastom.

Tkivo
Možgani, cerebelum
Bolezen
Meduloblastom
Sinonimi
  • DAOY
  • D324 Med
  • D-324 Med
  • D324 MED
  • D-324MED
  • D324

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Poligonalni
Čas podvojitve
34 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
Daoy (kataloška številka Cytion 305053)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1167

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
4 leta
Etnična pripadnost
Evropski