Ga naar de inhoud
Daoy
Weefsel
Hersenen, kleine hersenen
Ziekte
Medulloblastoom
Synoniemen
DAOY, D324 Med, D-324 Med, D324 MED, D-324MED, D324

Documenten

Daoy

Cell line · Productnummer 305053

The Daoy cell line, established in 1985 by P.F. Jacobsen at the Royal Perth Hospital in Western Australia, is a human cell line derived from a medulloblas...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De Daoy-cellijn, in 1985 ontwikkeld door P.F. Jacobsen in het Royal Perth Hospital in West-Australië, is een menselijke cellijn afkomstig van een medulloblastoom, een type hersentumor dat voornamelijk bij kinderen voorkomt. Deze cellijn is ontstaan uit een biopsie van een achterste fossa tumor bij een 4-jarige jongen. Medulloblastomen bevinden zich meestal in de kleine hersenen, een gebied in de hersenen dat cruciaal is voor de motorische controle en coördinatie, en zijn de meest voorkomende kwaadaardige hersentumoren bij kinderen.

Daoy-cellen worden op grote schaal gebruikt als modelsysteem voor het bestuderen van de biologie van medulloblastoom, waaronder tumorinitiatie, -progressie en -respons op therapieën. De cellijn is van groot belang geweest voor onderzoek naar medulloblastoom, met name voor het begrijpen van de moleculaire en genetische basis van de ziekte en voor het testen van chemotherapeutische middelen. De cellen vertonen typische kenmerken van kwaadaardige medulloblastomen, waaronder een snelle groei en het vermogen om tumoren te vormen bij transplantatie in immuungecompromitteerde muizen. Onderzoek met de Daoy-cellijn heeft bijgedragen aan de ontwikkeling van potentiële nieuwe behandelingen en therapeutische doelen voor medulloblastoom.

Weefsel
Hersenen, kleine hersenen
Ziekte
Medulloblastoom
Synoniemen
  • DAOY
  • D324 Med
  • D-324 Med
  • D324 MED
  • D-324MED
  • D324

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Veelhoekig
Verdubbelingstijd
34 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Daoy (Cytion catalogusnummer 305053)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1167

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
4 jaar
Etnische afkomst
Europese