Mine otse sisu juurde
Daoy
Kude
Aju, väikeaju
Haigus
Medulloblastoom
Sünonüümid
DAOY, D324 Med, D-324 Med, D324 MED, D-324MED, D324

Dokumendid

Daoy

Cell line · Toote number 305053

The Daoy cell line, established in 1985 by P.F. Jacobsen at the Royal Perth Hospital in Western Australia, is a human cell line derived from a medulloblas...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Daoy rakuliin, mille rajas 1985. aastal P. F. Jacobsen Lääne-Austraalias asuvas Perthi kuninglikus haiglas, on inimese rakuliin, mis on saadud medulloblastoomist, mis on peamiselt lastel esinev ajukasvaja tüüp. See rakuliin pärineb 4-aastase poisi tagumise vatsakese kasvaja biopsiast. Medulloblastoomid paiknevad tavaliselt väikeaju piirkonnas, mis on ülioluline motoorse kontrolli ja koordinatsiooni jaoks, ning on kõige sagedasemad pahaloomulised ajukasvajad lastel.

Daoy rakke kasutatakse laialdaselt medulloblastoomi bioloogia, sealhulgas kasvaja tekke, progresseerumise ja ravivastuse uurimiseks. See rakuliin on aidanud kaasa medulloblastoomi uurimisele, eelkõige haiguse molekulaarse ja geneetilise aluse mõistmisel ning kemoterapeutiliste ainete katsetamisel. Rakkudel on pahaloomulise medulloblastoomi tüüpilised tunnused, sealhulgas kiire kasvukiirus ja võime moodustada immuunpuudulikku hiirtesse siirdamisel kasvajaid. Daoy rakuliini abil tehtud uuringud on aidanud kaasa medulloblastoomi võimalike uute ravimeetodite ja terapeutiliste sihtmärkide väljatöötamisele.

Kude
Aju, väikeaju
Haigus
Medulloblastoom
Sünonüümid
  • DAOY
  • D324 Med
  • D-324 Med
  • D324 MED
  • D-324MED
  • D324

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Polügonaalne
Kahekordistumisaeg
34 tundi

04Tunnused

Viide
Daoy (Cytioni katalooginumber 305053)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1167

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
4 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa