Skip to content
Daoy
Tissue
Cerebro, cerebelo
Disease
Meduloblastoma
Synonyms
DAOY, D324 Med, D-324 Med, D324 MED, D-324MED, D324

Documents

Daoy

Cell line · Product number 305053

The Daoy cell line, established in 1985 by P.F. Jacobsen at the Royal Perth Hospital in Western Australia, is a human cell line derived from a medulloblas...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular Daoy, establecida en 1985 por P. F. Jacobsen en el Royal Perth Hospital de Australia Occidental, es una línea celular humana derivada de un meduloblastoma, un tipo de tumor cerebral que se presenta principalmente en niños. Esta línea celular se originó a partir de una biopsia de un tumor de la fosa posterior en un niño de 4 años. Los meduloblastomas suelen ubicarse en el cerebelo, un área del cerebro crucial para el control motor y la coordinación, y son los tumores cerebrales malignos más comunes en los niños.

Las células Daoy se utilizan ampliamente como sistema modelo para estudiar la biología del meduloblastoma, incluyendo la iniciación del tumor, su progresión y la respuesta a las terapias. La línea celular ha sido fundamental en la investigación del meduloblastoma, particularmente para comprender las bases moleculares y genéticas de la enfermedad, así como para evaluar agentes quimioterapéuticos. Las células presentan características típicas de los medulloblastomas malignos, entre ellas tasas de crecimiento rápidas y la capacidad de formar tumores cuando se trasplantan a ratones inmunodeprimidos. La investigación con la línea celular Daoy ha contribuido al desarrollo de posibles nuevos tratamientos y dianas terapéuticas para el medulloblastoma.

Tissue
Cerebro, cerebelo
Disease
Meduloblastoma
Synonyms
  • DAOY
  • D324 Med
  • D-324 Med
  • D324 MED
  • D-324MED
  • D324

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Poligonal
Doubling time
34 horas

04Identifiers

Citation
Daoy (número de catálogo de Cytion 305053)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1167

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), con: 2 mM de L-glutamina, con: 2,2 g/L de NaHCO₃, con: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS y un 1 % de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

07Donor

Donor age
4 años
Ethnicity
Europeo