Přejít na obsah
Buňky HT-1080
Nemoc
Fibrosarkom
Synonyma
Ht-1080, HT 1080, HT1080, HT 1080.T

Dokumenty

Buňky HT-1080

Cell line · Číslo výrobku 300216

Buňky HT-1080, které byly v roce 1972 izolovány z pojivové tkáně 35letého pacienta s fibrosarkomem, se široce používají ke studiu mechanismů …

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky HT-1080, získané z pojivové tkáně 35letého muže s fibrosarkomem v roce 1972, jsou vzhledem ke své vysoce agresivní a invazivní povaze hojně využívány ke studiu mechanismů nádorové invazivity a metastazování.

Buňky HT-1080 byly hojně využívány ve studiích zahrnujících buněčnou migraci, testy invaze a testování protinádorových sloučenin. V oblasti terapeutického vývoje se buňky HT-1080 používají při screeningu protinádorových léčiv a při hodnocení jejich účinků na životaschopnost buněk, apoptózu a metastatický potenciál.

Buňky HT-1080 se rovněž používají ve výzkumu zaměřeném na extracelulární matrix, angiogenezi a úlohu různých genů a proteinů při progresi rakoviny. Buňky HT-1080 produkují matrixové metaloproteinázy (MMP), enzymy, které rozkládají složky extracelulární matrix a hrají klíčovou roli v nádorové invazi a metastazování. Díky této vlastnosti je buněčná linie HT-1080 užitečná pro studie zkoumající regulaci MMPs a jejich inhibitorů.

Lze shrnout, že buněčná linie HT-1080 s rozsáhlým využitím při studiu výzkumu rakoviny, modelů buněčné adheze, migrace a invaze, jakož i při vývoji terapeutických strategií, je i nadále cenným zdrojem ve výzkumu rakoviny.

Nemoc
Fibrosarkom
Synonyma
  • Ht-1080
  • HT 1080
  • HT1080
  • HT 1080.T

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Fibroblasty
Tumorogenní
Ano, u imunosuprimovaných myší
Karyotyp
Modální číslo: 2n=46, pseudodiploidní

04Identifikátory

Citace
HT-1080 (katalogové číslo Cytion 300216)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0317

05Exprese a náchylnost

Isoenzymy
G6PD, B
Onkogeny
Ras+
Náchylnost k virům
Poliovirus 1, vezikulární stomatitida (Indiana), RD114, virus kočičí leukémie (FeLV)
Reverzní transkriptáza
Negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
Každé 3 dny
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
35 let
Etnická příslušnost
Kavkazský