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Cellule HT-1080
Malattia
Fibrosarcoma
Sinonimi
Ht-1080, HT 1080, HT1080, HT 1080.T

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Cellule HT-1080

Cell line · Codice prodotto 300216

Le cellule HT-1080, derivate dal tessuto connettivo di un paziente di sesso maschile di 35 anni affetto da fibrosarcoma nel 1972, sono ampiamente utilizzate per lo studio dei meccanismi di ...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule HT-1080, derivate dal tessuto connettivo di un paziente maschio di 35 anni affetto da fibrosarcoma nel 1972, sono ampiamente utilizzate per studiare i meccanismi di invasività e metastasi dei tumori a causa della loro natura altamente aggressiva e invasiva.

Le cellule HT-1080 sono state ampiamente utilizzate in studi che riguardano la migrazione cellulare, i saggi di invasione e la sperimentazione di composti antitumorali. Nel campo dello sviluppo terapeutico, le cellule HT-1080 sono impiegate nello screening di farmaci antitumorali e nella valutazione dei loro effetti sulla vitalità cellulare, sull'apoptosi e sul potenziale metastatico.

Le cellule HT-1080 sono state utilizzate anche nella ricerca sulla matrice extracellulare, sull'angiogenesi e sul ruolo di vari geni e proteine nella progressione del cancro. Le cellule HT-1080 producono metalloproteinasi della matrice (MMP), enzimi che degradano i componenti della matrice extracellulare e svolgono un ruolo critico nell'invasione tumorale e nelle metastasi. Questa caratteristica rende la linea cellulare HT-1080 utile per studi sulla regolazione delle MMP e dei loro inibitori.

In sintesi, la linea cellulare HT-1080, con le sue ampie applicazioni nello studio della ricerca sul cancro, dei modelli di adesione, migrazione e invasione cellulare e nello sviluppo di strategie terapeutiche, continua a essere una risorsa preziosa nella ricerca sul cancro.

Malattia
Fibrosarcoma
Sinonimi
  • Ht-1080
  • HT 1080
  • HT1080
  • HT 1080.T

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Fibroblasti
Tumorigenico
Sì, in topi immunosoppressi
Cariotipo
Numero modale: 2n=46, pseudodiploide

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HT-1080 (numero di catalogo Cytion 300216)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0317

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
G6PD, B
Oncogeni
Ras+
Suscettibilità ai virus
Poliovirus 1, stomatite vescicolare (Indiana), RD114, virus della leucemia felina (FeLV)
Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
35 anni
Etnia
Caucasico