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Células HT-1080
Doença
Fibrossarcoma
Sinónimos
Ht-1080, HT 1080, HT1080, HT 1080.T

Documentos

Células HT-1080

Cell line · Número do produto 300216

As células HT-1080, derivadas do tecido conjuntivo de um doente do sexo masculino de 35 anos com fibrossarcoma, em 1972, são amplamente utilizadas para estudar os mecanismos de...

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01Informações gerais

Descrição

As células HT-1080, derivadas do tecido conjuntivo de um doente do sexo masculino de 35 anos com fibrossarcoma em 1972, são amplamente utilizadas para estudar os mecanismos de invasão tumoral e metástases devido à sua natureza altamente agressiva e invasiva.

As células HT-1080 têm sido amplamente utilizadas em estudos que envolvem migração celular, ensaios de invasão e testes de compostos anticancerígenos. No domínio do desenvolvimento terapêutico, as células HT-1080 são utilizadas no rastreio de medicamentos anticancerígenos e na avaliação dos seus efeitos sobre a viabilidade celular, a apoptose e o potencial metastático.

As células HT-1080 também têm sido utilizadas em investigação centrada na matriz extracelular, na angiogénese e no papel de vários genes e proteínas na progressão do cancro. As células HT-1080 produzem metaloproteinases de matriz (MMPs), enzimas que degradam componentes da matriz extracelular e desempenham um papel crítico na invasão e metástase do tumor. Esta caraterística torna a linha celular HT-1080 útil para estudos que investigam a regulação das MMPs e os seus inibidores.

Em resumo, a linha celular HT-1080, com as suas vastas aplicações no estudo da investigação do cancro, modelos de adesão, migração e invasão celular, bem como no desenvolvimento de estratégias terapêuticas, continua a ser um recurso valioso na investigação do cancro.

Doença
Fibrossarcoma
Sinónimos
  • Ht-1080
  • HT 1080
  • HT1080
  • HT 1080.T

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Fibroblastos
Tumorigénico
Sim, em ratinhos imunossuprimidos
Cariótipo
Número modal: 2n=46, pseudodiplóide

04Identificadores

Referência
HT-1080 (número de catálogo Cytion 300216)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0317

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
G6PD, B
Oncogenes
Ras+
Susceptibilidade ao vírus
Poliovírus 1, estomatite vesicular (Indiana), RD114, vírus da leucemia felina (FeLV)
Transcriptase reversa
Negativo

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
A cada 3 dias
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
35 anos
Etnia
Caucasiano