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HNO258-Zellen
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Mundhöhle
Krankheit
Plattenepithelkarzinom des Kopfes und Halses (HNSCC)

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HNO258-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300146

Die Zelllinie HNO258 stammt aus einem oralen Plattenepithelkarzinom, einem Subtyp des Kopf-Hals-Plattenepithelkarzinoms (HNSCC). Diese Zelllinie …

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie HNO258 stammt von einem oralen Plattenepithelkarzinom, einem Subtyp des Plattenepithelkarzinoms des Kopfes und Halses (HNSCC). Diese Zelllinie weist mehrere chromosomale Anomalien auf, die durch chromosomale vergleichende genomische Hybridisierung (cCGH) identifiziert wurden. Insbesondere hat HNO258 DNA-Kopienzahlgewinne in den chromosomalen Regionen 1q41, 3q21-qter, 7p, 7cen-q21, 8q22-qter, 9cen-p13, 9q31-qter, 11q13, 15p und 15q gezeigt. Außerdem weist es Kopienzahlverluste in den Regionen 4p und 18q12-qter auf. Diese genetischen Veränderungen sind bei HNSCC häufig und werden mit der Tumorentstehung und dem Fortschreiten des Krebses in Verbindung gebracht.

Die bei HNO258 beobachtete Amplifikation von 11q13 ist besonders bemerkenswert, da sie mit der Überexpression von Onkogenen wie CCND1 (Cyclin D1) und CTTN (Cortactin) einhergeht, die an der Regulierung des Zellzyklus bzw. der Organisation des Zytoskeletts beteiligt sind. Diese Onkogene werden häufig mit dem aggressiven Verhalten von Krebszellen in Verbindung gebracht und tragen zu einer erhöhten Proliferation und Invasivität bei. Die detaillierte genetische Charakterisierung von HNO258 macht es zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der molekularen Mechanismen, die dem oralen Plattenepithelkarzinom zugrunde liegen, und für die Evaluierung potenzieller therapeutischer Strategien, die auf diese spezifischen genetischen Veränderungen abzielen.

Gewebe
Mundhöhle
Krankheit
Plattenepithelkarzinom des Kopfes und Halses (HNSCC)

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
HNO258 (Cytion Katalognummer 300146)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_D221

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
62 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch